在抗感染免疫过程中，中性粒细胞可通过释放中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap，NET)捕获并杀伤病原体。NET是一把“双刃剑”，一方面可维持机体稳态，另一方面NET过量或清除不及时会导致一些疾病的发生。细菌诱导和抵御NET的机制不尽相同，本文就NET的生成和释放及其在细菌感染过程中的作用进行综述。

随着人民生活水平的不断提高，创造仅仅具有适宜温度、湿度的舒适性空气环境已不能满足人们生活的需要，健康清洁的空气质量开始成为大众关注的热点。近年来，新型冠状病毒肆虐全球，气溶胶传播作为感染途径之一理应得到足够的重视。空气净化消毒技术对于防止细菌、病毒等病原体的扩散传播具有切实重要的意义。本文主要对多种物理类及化学类空气净化消毒技术进行详细的归纳介绍，分析这些技术在研究及应用中存在的问题，总结未来理想的空气净化消毒技术应当具备的特点。

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)是引起2019冠状病毒病(coronavirus disease 2019，COVID-19)的病原体，在人群中广泛持久传播，对人类健康和社会经济造成了巨大危害。目前，针对COVID-19的治疗尚无特异高效的抗病毒药物。病毒为实现寄生感染，通常先与宿主细胞膜表面受体结合，进而内化入胞。因此，SARS-CoV-2受体决定着病毒的感染特性和宿主范围，对其进行研究和解析是战胜SARS-CoV-2感染的一个关键手段。SARS-CoV-2受体的发现和鉴定，将为COVID-19提供新的治疗靶点。本文主要对SARS-CoV-2入侵受体及黏附受体的研究进展进行综述。

病毒性脑(膜)炎是一种严重威胁公共卫生的中枢神经系统炎症性疾病。尽管病史、症状体征、常规检测、影像学，以及分子诊断技术的不断改进等对病毒性脑(膜)炎诊断具有至关重要的作用，但其仍然受到技术、检测试剂、样本类型、检测时间窗口等因素的限制，且须根据不同的临床特征选择合适的诊断技术。仍有40%～60%的患者难以明确病因，进行及时、准确的诊断是开展针对性适当治疗的基石。60%～80%的病毒性脑(膜)炎患者首次就诊发生在基层医疗机构，而基层医院因技术条件所限，确诊率低于20%，因此制定规范化的病因学诊断路径，实行分级诊断策略尤为必要。在基层医院条件有限的情况下，通过详细询问病史、全面体格检查及基本实验室检查初步确定诊断方向；根据疑似病因，通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)等常规分子生物学技术进行病原体初筛；在PCR结果阴性或不可行时，考虑应用如宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing，mNGS)的非靶向广覆盖技术；建立多学科团队诊疗模式及临床诊疗网络以提高确诊率，改善患者的临床结局。随着检测技术的进步和人工智能的应用，病毒性脑(膜)炎诊断将更准确。

人类阴道微生物组(vaginal microbiome，VMB)在维持人体健康和微生态平衡方面起着至关重要的作用，与其他器官的微生物组相比，VMB表现出低多样性。宫颈癌(cervical cancer，CC)是女性常见的恶性肿瘤，已证实与高危型人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)的持续感染高度相关。阴道微生物与HPV感染和宫颈病变存在相关性，一方面乳杆菌可降低宫颈细胞的通透性，减少炎症反应，抑制宫颈癌细胞的生长，而非乳杆菌主导的高多样性阴道菌群可表达与宫颈细胞黏附及毒性相关的基因，损伤宫颈及上皮细胞，引起HPV感染和高级别宫颈上皮内瘤变；另一方面，HPV 相关E7癌蛋白可通过NF-β-κB和Wnt/β-catenin信号通路减少防御肽的分泌，从而抑制乳杆菌生长，导致阴道pH值升高和阴道致病菌的生长，引起VMB的结构变化。本文主要讨论VMB、HPV持续感染和宫颈病变之间的关系及病因，旨在寻找VMB相关疾病的新靶点。

髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)是一群表型异常、具有免疫抑制功能的髓系来源细胞。在进展期肿瘤、败血症、慢性感染等病理环境中，MDSCs大量扩增并通过多种途径抑制T淋巴细胞等免疫细胞的增殖、活化和迁移，MDSCs的数量与疾病进程和患者转归密切相关。通过单细胞测序、质谱流式等新技术，研究人员发现MDSCs和正常髓系细胞在表型标记分子、基因表达、能量代谢和调控通路上存在明显差异。特别是在肿瘤领域，MDSCs靶向治疗研究也取得了丰硕的成果。本文以MDSCs研究里程碑为起点，以MDSCs靶向治疗机制及其在感染性疾病中的作用为重点，对MDSCs新近研究成果进行综述。

粪菌移植(fecal microbiota transplantation，FMT)是一种创新的方法，通过将健康供体的粪便微生物群移植到疾病患者体内，达到重建肠道微生态平衡的目的，为治疗疾病提供帮助。粪菌移植技术在复发性艰难拟梭菌感染(recurrent Clostridioides difficile infection，rCDI)的治疗中效果很好，并且其治疗潜力不仅局限于胃肠道疾病，而且在其他与微生物相关的疾病中被不断挖掘。探索FMT成功治疗疾病的影响因素，除了肠道细菌的恢复，还涉及肠道噬菌体的调节。肠道噬菌体是肠道微生物群的重要组成部分，在细菌的复杂动力学中发挥着重要作用，其转移可能与FMT的疗效有关。本综述回顾了肠道噬菌体的生物学特性和主要的生物信息学分析策略，总结了FMT中肠道噬菌体作用的临床研究，探讨了FMT中肠道噬菌体群落的变化和可能的作用机制，讨论了肠道噬菌体与FMT疗效的关系及其存在的安全性问题，既能提高对FMT中肠道噬菌体作用的理解，也能推动FMT的临床应用。

含热蛋白结构域的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 6(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain containing 6，NLRP 6)是宿主固有免疫重要的胞内模式识别受体之一，参与机体感染、炎症、肿瘤和代谢性疾病的调节。它可通过感知细菌、病毒、真菌和寄生虫等病原生物及其产物，如革兰氏阳性菌脂磷壁酸(lipoteichoic acid，LTA)和病毒双链RNA，调节机体抗感染免疫效应，减弱或增强宿主的抵抗力，从而影响感染的转归。本文就NLRP 6的结构与功能及其在抗细菌感染免疫中的作用研究作综述。

Ⅶ型分泌系统（Type VII secretion system, T7SS）是唯一一种仅存在于革兰氏阳性细菌中的分泌系统。T7SS在细菌与细菌、细菌与宿主、细菌与环境相互作用中发挥着重要功能，与细菌的生长和致病性密切相关。T7SS的功能多样性与其所分泌的效应蛋白的多样性密切相关。因此，本文将围绕T7SS所分泌的效应蛋白展开讨论，对效应蛋白的结构和功能、分泌机制及其基因转录水平的调控方式等多方面进行综述，以期为进一步研究细菌的T7SS提供新的思路。

发热伴血小板减少综合征病毒(sever fever with thrombocytopenia syndrome virus，SFTSV)是近年发现的新病毒。该病毒感染引起的发热伴血小板减少综合征(sever fever with thrombocytopenia syndrome，SFTS)以高热、血小板和白细胞减少、多脏器功能损伤为主要临床特征，死亡率5%～30%。目前尚无验证有效的抗病毒药物和疫苗。SFTSV感染可引起患者免疫功能紊乱，B淋巴细胞是该病毒感染的重要靶细胞之一，但SFTSV感染对B淋巴细胞功能的影响尚不完全清楚。本文对SFTSV感染引起的B淋巴细胞免疫功能异常及其机制研究进行综述，以期促进SFTSV感染的免疫病理机制研究，为深入认识SFTSV感染对B淋巴细胞的影响，开发相关诊疗技术提供基础。

在急性或慢性等不同感染情况下B淋巴细胞应答规律各异。本研究旨在构建重组Armstrong株和重组Clone13株淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus, LCMV)，以诱导针对WE株糖蛋白(glycoprotein, GP)特异的B细胞受体(B cell receptor, BCR)转基因细胞KL25HL B细胞应答，从而为比较急慢性感染过程中宿主B细胞的免疫应答差异建立实验模型。首先，通过共转染细胞，使之转录LCMV基因组片段并表达病毒蛋白，成功拯救出重组LCMV-Armstrong(recombinant LCMV-Armstrong，rARM)和重组LCMV-Clone13(recombinant LCMV-Clone13，rCL13)。测序分析表明，这2种重组病毒的GP序列被成功替换为LCMV-WE株的GP序列，并证实它们在感染细胞后具备蚀斑形成能力。随后，本研究使用rARM及rCL13感染野生型C56BL/6J小鼠。结果表明，这2种重组病毒保留了野生LCMV-Armstrong(wild type LCMV-Armstrong, wtARM)或野生LCMV-Clone13(wild type LCMV-Clone13, wtCL13)株等所具备的急性或慢性感染特性。具体而言，在rARM和rCL13建立感染后，rARM将在1周内被宿主免疫系统快速清除，而rCL13可在宿主体内持续存在超过2个月。最后，用不同LCMV感染过继转移了KL25HL B细胞的野生型小鼠。结果显示，与wtARM或wtCL13相比，感染rARM或rCL13后可明显诱导特异性B细胞发生激活、增殖等免疫应答反应。本研究构建的rARM及rCL13在感染小鼠并过继KL25HL B细胞后，可作为急慢性感染中B淋巴细胞应答规律比较研究的有力工具，对于深入理解体液免疫应答机制具有重要意义。

克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease, CJD)是一种在人类中最为常见的海绵状脑病，其致病因子为朊病毒。由于该病的致死率为100%，且具有传播风险，CJD的早期诊断对疾病防控具有重要意义。临床上一般依据患者的临床症状与体征以及相应的实验室检测来进行CJD的鉴别诊断。本文主要围绕现有的CJD实验室检测技术展开综述，包括朊病毒的直接与间接检测、疾病标志物的检测以及疾病相关基因PRNP的检测与分析等，旨在为进一步推广和规范CJD的实验室检测提供参考与技术依据。

本研究旨在分析某医院两年来引起医院感染的耐药金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S. aureus)体外药敏试验结果、耐药类型及感染危险因素，探讨其在临床控制耐药菌的发生、医院感染和合理应用抗菌药物方面的参考价值。分析2020—2021年度从本院医院感染患者体内分离的耐药金黄色葡萄球菌的药敏试验结果，并采用单因素和Logistic回归分析探讨耐药金黄色葡萄球菌感染的独立危险因素。结果显示，多重耐药的金黄色葡萄球菌菌株占49.7%(69/139)，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus，MRSA)菌株占41.0%(57/139)，产β-内酰胺酶(BETA-LACT)菌株占72.7%(101/139)，克林霉素诱导型(INDUC-CLI)耐药菌株占15.1%(21/139)。金黄色葡萄球菌主要分离自呼吸道和伤口感染部位(36.0%和48.9%)，其对多种抗菌药物的耐药率较高，对万古霉素和替加环素敏感率达100%，对利奈唑胺和氯霉素敏感率分别为99.28%和93.85%。回归分析显示，侵入性操作的OR值为3.184，P<0.05。本研究证实金黄色葡萄球菌主要从伤口部位样本分离，临床多重耐药细菌占比较高，多数为耐甲氧西林和产β-内酰胺酶菌株，临床常用抗菌药物的耐药率较高；侵入性操作是耐药S. aureus感染的独立危险因素。

本研究旨在了解关节假体周围感染(periprosthetic joint infection，PJI)中金黄色葡萄球菌小菌落变异体(Staphylococcus aureus small colony variant，SASCV)的毒力、耐药基因携带情况及分子型别，为探讨其致病机制提供基础数据。收集从19例PJI患者关节液中分离出的SASCV，进行全基因组测序、生物信息学分析及数据库比对，以了解其毒力相关基因和耐药基因的携带情况；采用多位点序列分型(multilocus sequence typing，MLST)分析菌株型别，并构建系统发育树。结果显示，19株SASCV中，有8株与正常形态金黄色葡萄球菌混合生长。对全部27株菌株进行全基因组测序，基因组长度为 2 696 437～3 011 803 bp，G＋C 含量为(32.8±0.05)%。共检出23种毒力相关基因：其中14种黏附素相关基因的检出率较高，为21.1%～100.0%；4种与免疫逃逸相关基因的检出率为36.8%～68.4%；5种溶血及杀白细胞素基因也有检出。耐药基因检出12种：blaZ检出率为78.9%(15/19)；mecA检出率为31.6%(6/19)；大环内酯类及氨基糖苷类抗生素耐药基因也有不同比例的检出。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌中耐药基因的检出数量高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。MLST分析结果显示，19株SASCV共分10个型别。8组表型混合生长的菌株中，2组SCV与正常表型菌株分属不同型别，且毒力及耐药基因差异较大，其余6组为同一型别。本研究还发现，PJI中SASCV的生物膜相关黏附素基因检出率高，耐药基因中mecA检出率较高，MLST以ST59最多，其次为ST398和ST25。SCV与正常表型菌株混合生长时可分属不同型别。

RNA荧光原位杂交(RNA-fluorescence in situ hybridization, RNA-FISH)技术利用荧光标记的核苷酸探针，通过互补链杂交，对细胞或组织中特定的RNA序列进行检测和定位。由于RNA-FISH产生的阳性信号较弱，需要结合特异性信号放大，提高信噪比。但传统信号放大技术的背景难以消除，无法定量且分辨率低，是RNA-FISH技术应用的巨大障碍。本文基于第3代杂交链反应(hybridization chain reaction version 3.0，HCR v3.0)，利用一对分裂式探针消除非特异杂交背景，并引发荧光信号放大反应，建立了针对肠道病毒A71 (enterovirus-A71, EV-A71) RNA的敏感、特异的FISH检测方法，并将该技术与蛋白免疫荧光(immunofluorescence, IF)检测结合，通过高分辨率激光共聚焦成像，成功地在单个细胞水平上检测了EV-A71感染细胞后病毒RNA与其聚合酶3D蛋白的分布变化和相互作用情况，并对细胞中病毒RNA和3D蛋白进行定量。发现相较于传统定量方法，如逆转录定量聚合酶链反应和免疫印迹，新一代RNA-FISH技术在单个细胞水平上病毒RNA和3D聚合酶的表达情况与群体细胞检测的结果在趋势上有明显差异。这说明，基于杂交链反应的新一代RNA-FISH技术，可以克服群体细胞数量增减掩盖病毒组分变化的缺点，从而真实反映病毒在单个细胞中的变化。

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)及其变异毒株引发的疫情给全球的公共卫生安全带来了极大的挑战。尽管现阶段各国已进入后疫情时代，但目前面临的新的危机是SARS-CoV-2感染后给患者造成的长期影响，主要表现为呼吸、神经、精神、心血管和消化等系统的症状，部分患者的症状包括并发症可持续数月甚至数年，被称之为长新冠(long COVID)或后COVID-19综合征。在未来数年，这些症状可能会显著地影响患者的生活质量，增加社会医疗保健成本，给家庭和社会造成巨大负担。因此研究新型冠状病毒肺炎患者在恢复期的长期健康状况及其动态变化规律至关重要。

【摘要】微生物共定植与共感染的发生、发展及持续具有相关性，共定植的微生物通常能使其对抗菌药物耐药性及对机体致病性增加，因而这成为临床医生面临的一个难题，但共定植微生物之间的相互作用是非常复杂的，不同的微生物之间影响方式不同，并且可随着定植时间的不同而发生改变。本文对临床上常见耐药菌共定植检出情况、发生的危险因素以及定植菌之间的相互作用做一概述。

本综述旨在全面概述尼帕病毒动物模型的研究进展，更好地了解尼帕病毒感染途径、致病机理和疫苗抗体的针对性开发评价。尼帕病毒是一种病死率高、生物安全4级的人畜共患副粘病毒，自1998年在马来西亚首次爆发以来，持续在东南亚和南亚引发疫情，会导致人类和动物出现严重呼吸道疾病和脑炎且目前尚无批准上市的疫苗或治疗药物。世界卫生组织已将尼帕病毒病列为优先研究的传染病。本综述概括尼帕病毒感染动物模型的构建发展，多个种属的动物已被用于尼帕活病毒感染模型动物的开发，如金黄地鼠、雪貂、猪、非洲绿猴和豚鼠等，它们能够不同程度反映尼帕病毒感染的症状和病理特征以及模型的优势和局限性。本综述还探讨了假病毒动物感染模型的建立与应用，展望了尼帕病毒动物模型研究的未来方向。

本研究旨在了解和掌握狂犬病、弓形虫和A型流感在社区流浪猫中的免疫和流行状况，为社区流浪猫人兽共患病公共卫生防控提供依据。采用实时荧光聚合酶链式反应（PCR）检测流浪猫全血样本中弓形虫核酸，以及咽喉和肛门拭子样本中流感病毒核酸。本研究对2022年6月至2023年8月在上海青浦地区40个小区采集的153只流浪猫血清样品开展狂犬病、弓形虫和A型流感病毒抗体检测，并对A型流感抗体阳性样品开展H3、H5、H7和H9分型鉴定。结果显示153份流浪猫血清样品狂犬病、弓形虫和A型流感抗体阳性率分别为14.38%（22/153）、11.76%（18/153）和3.92%（6/153）。春季（3-5月）和夏季（6-8月）弓形虫血清抗体阳性率差异极显著。检出H3亚型抗体阳性样品1份，阳性率0.65%（1/153）。研究表明上海地区流浪猫狂犬病免疫抗体水平不足以阻断狂犬病病毒传播。流浪猫群体存在弓形虫感染，尤其在夏季传播风险更高。流浪猫存在A型流感病毒感染，提示流浪猫可以成为人和动物流感病毒的“混合器”，造成人兽共患病传播风险。因此，有必要对流浪猫群体开展狂犬病、弓形虫、A型流感病毒感染情况持续监测，为科学防控提供依据。

为探索伤寒沙门菌Ⅵ型分泌系统(type 6 secretion system, T6SS)对SopE表达的影响，阐明其中的分子机制，本研究利用自杀质粒同源重组法构建携带sopE∷3×Flag的伤寒沙门菌野生株(WT-pBAD33)、T6SS功能分子缺陷株(ΔsciG-pBAD33)和回补株(C-ΔsciG)，用构建成功的菌株感染巨噬细胞THP-1并在模拟巨噬细胞内环境(LPM培养基、微需氧)下培养，通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，qRT-PCR)与蛋白质印迹法(Western blot, WB)试验探索T6SS对SopE表达的影响，采用β-半乳糖苷酶活性检测来进一步验证sopE基因启动子的转录水平，Ni柱纯化T6SS功能蛋白SciG，电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay，EMSA)研究SciG蛋白对sopE基因启动子的调控作用。结果显示：ΔsciG-pBAD33中SopE表达水平较于WT-pBAD33明显降低；SciG蛋白不能直接与sopE基因启动子区域结合。本研究结果表明，伤寒沙门菌T6SS影响了SopE的表达，但是其功能蛋白SciG不能直接调控sopE基因的表达。

结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)作为全球流行性、慢性传染病结核病的病原体，其致病机制、耐药性与其特异性细胞壁成分密切相关，尤其是脂质成分，如脂阿拉伯甘露聚糖、海藻糖二霉菌酸酯、酚糖脂等糖脂类。因此，结核分枝杆菌细胞壁脂质成分的相关研究对结核病的诊断、防治具有重要价值。本文对结核分枝杆菌细胞壁部分脂质成分的生物学活性作一综述，以期为结核分枝杆菌相关基础研究提供参考。

本实验室在1例气管切开患者的痰培养标本中，发现了1种膜状生长的革兰阴性杆菌。使用全自动细菌鉴定仪Vitek2 Compact鉴定该细菌，没有得到阳性结果。分别使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)和 16S 核糖体RNA(16S ribosomal RNA，16S rRNA)测序的方法对该菌进行鉴定，结果显示为肢体凯斯特菌。该菌是一种革兰氏阴性非发酵菌。回顾国外文献仅有少量病例报道，该菌可能为条件致病菌，可在气管切开患者的痰液、肺泡灌洗液以及经皮造瘘患者的尿液中分离，还可引起菌血症并参与慢性耳炎的发生发展。国内文献对肢体凯斯特菌的分离研究罕见报道。本实验室将此病例及该菌的基本特性报道如下，以加强临床微生物检验人员对其的认识和重视。

本研究旨在进一步探讨结核性胸膜炎患者胸水和血清外泌体中miRNA的差异性表达情况，为寻找能够诊断与鉴别诊断结核性胸膜炎的潜在生物学标志物提供依据。收集20例肺结核合并结核性胸膜炎患者(试验组)、20例肺炎合并炎性胸水患者(对照组2)的胸水和血清样本，以及20例健康体检者(对照组1)的血清样本，分离外泌体后提取总RNA，采用实时荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)分析比较各组外泌体miRNA的相对表达量。结果显示，对照组2血清外泌体miRNA的表达水平均高于对照组1，其中升高明显的有let-7a-5p、let-7c-5p、let-7i-5p和miRNA-126-3p，而试验组血清外泌体中miRNA的表达水平升高得更明显，其中升高最为明显的有let-7a-5p、let-7d-5p、let-7e-5p、miRNA-126-3p、let-7g-5p和let-7c-5p，差异均有统计学意义(P＜0.05)；同时试验组胸水外泌体中miRNA水平普遍高于对照组2胸水外泌体水平，升高较明显的有let-7f-5p、let-7g-5p、let-7d-3p，差异也有统计学意义(P＜0.05)。本研究显示，结核性胸膜炎患者胸水和血清外泌体中miRNA与一般性肺炎合并胸水患者的胸水和血清中外泌体miRNA存在差异性表达，尤其hsm-let-7家族成员可能可以作为结核性胸水与一般炎性胸水的鉴别诊断指标。

本文报告1例可可毛色二孢致角膜溃疡。患者男，54岁，右眼发红，疼痛加重3天。眼科检查见右眼球结膜混合充血，角膜全层灰白色浑浊，呈地图状，面不平，前房下方可见淡白色沉积，余眼内情况窥不清。取角膜刮取物标本进行真菌荧光染色镜检和培养，对培养的菌株进行形态学和分子生物学鉴定，用E-test法进行丝状真菌药敏试验。真菌荧光染色后，镜下可见有隔菌丝。培养14 d有分生孢子座产生，分生孢子位于分生孢子座里。对培养出的丝状真菌进行基因测序，测序后确定病原菌为可可毛色二孢(Lasiodiplodia theobromae, L. theobromae)，临床诊断为可可毛色二孢引起的角膜溃疡。药敏试验结果显示，L. theobromae对两性霉素B和伏立康唑相对敏感。给予局部药物治疗，氟康唑滴眼液q2h滴右眼，同时使用氟康唑氯化钠注射液0.4 g qd静脉滴注。患者治疗5 d未见好转，要求出院。

【摘要】 目的 血流感染的死亡率和致残率较高，每年的死亡病例数可达800万，准确及时的病原学诊断至关重要。本研究的目的是评估液滴数字PCR（droplet digital PCR，ddPCR）在诊断血流感染的应用价值。方法 作为一项前瞻性研究，2021-2023年收集了55例疑似血流感染患者的血浆，将液滴数字PCR检测（3小时左右）与传统的血培养（blood culture，BC；最快48小时左右）结果进行比较。结果 ddPCR敏感性和阴性预测值较高，达到69.2%和90%，阳性率为70%，显著高于血培养。在ddPCR+/BC+组中，ddPCR检测出的病原菌的基因拷贝数与降钙素原、C反应蛋白、白细胞呈同步变化趋势；不过ddPCR阳性与血浆中的炎性因子降钙素原、C反应蛋白、白细胞没有显著相关性。通过药敏试验发现了6株碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌，ddPCR全部从相应标本检测出丝氨酸酶（blaKPC）或者金属酶（blaNDM和blaIMP）；分离出3株耐甲氧西林葡萄球菌的标本亦全部检测出mecA基因，ddPCR还从未培养出细菌的9份标本中检出耐药基因。结论 液滴数字PCR是一种快速的病原体的检测手段，可作为传统血培养的附加补充，与临床患者的症状相结合，可以快速诊断可疑的血流感染病例，同时对耐药基因的检测亦有潜在的优势。

微针作为一种高效的经皮免疫方式，可以穿透角质层，在不损害神经血管的情况下，将抗原递送至免疫细胞丰富的真皮层。其中，可溶性微针(dissolving microneedles, dMNs)由于制备简单、操作便捷、载药量大、不产生针尖废弃物等诸多优点而备受关注。本文总结了dMNs疫苗的免疫效果及目前的临床试验进展，同时探讨了dMNs在使用过程中存在的问题并展望未来的研究方向，以期为dMNs疫苗的相关研究提供参考，并推动其实际应用。

本研究旨在分析肿瘤患者血流感染哈特草螺菌的鉴定及药敏特点，同时对相关菌株感染病例进行回顾分析，为临床治疗提供指导依据。将1例肺腺癌患者放疗后留取的血培养阳性标本进行涂片、染色、镜检，同时采用VITEK MS全自动微生物质谱检测系统、VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统和分子测序技术对该分离株进行鉴定分析，并参照其他非发酵革兰氏阴性杆菌药敏实验标准进行药敏试验。结果显示，该分离株为革兰氏阴性杆菌，在血平板上呈乳白色、胶状、凸起、无溶血菌落。VITEK MS质谱仪和分子测序技术将此菌株均鉴定为哈特草螺菌(Herbaspirillum huttiense，H. huttiense)，VITEK 2 Compact将其鉴定为洋葱伯克霍尔德菌。药敏试验结果显示，该菌对氨曲南中介，对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦钠、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦和左氧氟沙星等抗菌药物均敏感。本研究报告了哈特草螺菌的生物学特征和病例的诊疗过程，强调了多种诊断技术联合应用在罕见菌鉴定中的重要性。

作为新近发现的血清学标志物，乙型肝炎核心相关抗原(Hepatitis B core-related antigen, HBcrAg)由乙型肝炎核心抗原(Hepatitis core antigen, HBcAg)、乙型肝炎e抗原(Hepatitis e antigen, HBeAg)、p22cr组成。血清HBcrAg可反映肝内共价闭合环状DNA的水平及转录活性，并在一定程度上预测慢性乙型肝炎(简称乙肝)患者自然转归或核苷(酸)类似物、干扰素的疗效与预后，包括复发、功能性治愈等临床结局的发生率等，从而为临床抗病毒治疗起点与终点的确定、治疗方案的选择提供指导。同时，HBcrAg水平与乙肝相关的肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)的发生率亦有关联，可识别潜在的HCC高危患者。因此，HBcrAg在慢性乙肝诊治中有着重要的临床应用价值。

脓毒症已成为入住重症监护室 (intensive care unit，ICU) 患者死亡的主要原因之一，然而目前对于脓毒症尚无特效性治疗办法。针对脓毒症病理生理的研究发现，免疫紊乱在脓毒症的发病及病情发展中起着重要作用。肠道菌群作为人体内最大的共生体，研究显示其可以通过多种方式影响宿主的免疫状态，但确切机制尚无统一报道。基于肠道菌群在宿主免疫调节中的作用，本文从肠道菌群产物的角度综述了肠道菌群在脓毒症免疫调节中的机制，指出肠道菌群一方面能够调节宿主免疫系统的发育和功能；另一方面，脓毒症诱导的肠道菌群失调也将导致菌群产物的改变，从而丧失对免疫系统的正常调节作用，这可能是促进脓毒症进一步发展的重要原因，而基于肠道菌群的生物疗法，或许有望成为脓毒症常规治疗外的重要补充。

本研究利用反向遗传学的方法成功拯救了一株盖塔病毒(Getah virus，GETV)(GenBank: OM363683)。首先，将优化后的病毒序列克隆到含有T7或CMV启动子的低拷贝质粒pFK中，分别命名为T7-GETV和CMV-GETV。以T7-GETV为模板，通过体外转录(in vitro transcription，IVT)合成病毒RNA。随后，采用脂质体转染的方式将RNA递送到BHK-21细胞中，通过半数组织培养感染量(50% tissue culture infectious dose，TCID₅₀)法测定病毒滴度，并利用免疫印迹法(western blot，WB)检测病毒蛋白E1表达，证明盖塔病毒被成功拯救。进一步通过光学显微镜观察细胞病变(cytopathic effect，CPE)，以及TCID₅₀法、实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR)和WB的方法，系统地表征盖塔病毒的生长特征。此外，在CMV-GETV的基础上，基于盖塔病毒复制子的结构，采取保留非结构蛋白基因并用报告基因mCherry或renilla luciferase(Rluc)代替结构蛋白基因的策略构建盖塔病毒复制型表达载体，分别命名为pFK-GETV-mCherry和pFK-GETV-Rluc。随后构建pFK质粒的CMV启动子并仅插入报告基因的对照质粒，分别命名为pFK-mCherry和pFK-Rluc。Image J软件分析显示，转染pFK-GETV-mCherry后单细胞平均荧光强度比转染pFK-mCherry高约5倍。同时，RT-qPCR结果表明，转染pFK-GETV-mCherry后mCherry基因转录水平也比转染pFK-mCherry高约5倍，两组结果高度一致。WB结果进一步说明，在相同时间点转染pFK-GETV-mCherry组mCherry蛋白表达水平比转染pFK-mCherry组高。荧光素酶检测显示，转染pFK-GETV-Rluc后细胞表达Rluc的效率比转染pFK-Rluc高约3个数量级。本研究为后续盖塔病毒研究提供了有力的反向遗传学工具，同时验证了盖塔病毒复制型表达载体提高外源基因表达水平的能力，为研究盖塔病毒复制型DNA疫苗奠定了基础。

核酸疫苗已成为现代传染病疫苗中的研究热点，然而，核酸疫苗的临床转化仍然面临着转染效率低下和生物相容性不佳等瓶颈，迫切需要研发安全、高效的核酸递送载体。本研究提出一种新的核酸递送策略，在聚(β-氨基酯)[poly(β-amino ester)，PBAE]和核酸自组装形成PBAE纳米颗粒(PBAE nanoparticles，PBAE-NPs)的基础上，进一步采用聚谷氨酸[poly(glutamic acid)，PGA]进行修饰，形成PGA修饰的PBAE纳米颗粒(PGA modified PBAE nanoparticles，PPs)。本文将通过结构表征和生物学评价探究PPs作为核酸递送载体的性能。体外表征结果显示，PPs具有粒径小、Zeta电位低和血清稳定性强等良好的生物学特性。细胞溶酶体逃逸实验结果表明，PGA修饰能够提高PPs的溶酶体逃逸能力。流式细胞术结果表明，相较于PBAE-NPs，PPs显著增强了核酸转染效率。此外，CCK-8实验结果显示，PPs具有良好的生物安全性。综上所述，PPs具有安全性好、核酸转染效率高等特点，是一种具有开发前景的核酸递送载体，为今后核酸疫苗载体的设计提供了新的思路。

免疫复合物的形成是病毒在感染过程中造成机体损伤的重要原因之一。对病毒感染者进行免疫复合物的定量有助于监测疾病进展，了解病毒与宿主之间的相互作用。本研究对早期固相C1q结合荧光免疫法进行优化，并利用补体分子C1q特异性结合慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)患者血液中的循环免疫复合物(circulating immune complex，CIC)，通过荧光标记的羊抗人IgG对CIC进行检测。针对220例CHB患者、20例非乙型肝炎的肝炎患者、20例健康者、10例CHB功能性治愈者，分析了CHB患者中的CIC水平及其与CHB诊断所用病毒学指标、肝功能生化指标之间的关系。结果显示：约97%的CHB患者存在CIC水平升高，且与病毒学指标乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen，HBsAg)(r＝0.197 3，P＝0.005 8)、HBV DNA(r＝0.217 8，P＝0.002 3)显著正相关；与肝脏损伤相关生化指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)(r＝0.158 0，P＝0.020 0)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)(r＝0.151 3，P＝0.035 3)呈正相关，而与补体C4(r＝－0.21，P＝0.003)呈负相关。不同程度的炎症和纤维化患者之间CIC和补体水平有显著性差异，且随临床分期产生相应波动。在免疫耐受期和低复制期，患者CIC水平较低而补体水平升高；在免疫激活期和HBV e抗原(HBV e antigen，HBeAg)阴性肝炎患者中的结果则相反。结果提示，CHB患者血液循环中存在CIC生成所造成的肝脏损伤及补体大量消耗，对CIC进行监测能在一定程度上反映CHB患者潜在的肝损伤。

本研究旨在探讨南宁地区儿童耳炎病原菌分布及其药物敏感性，为临床医生合理用药提供依据。通过回顾性分析2019—2021年广西壮族自治区妇幼保健院收治的外耳道炎或中耳炎患儿的基本资料，统计培养分离的细菌和真菌构成比，并分析主要致病菌的耐药情况。结果显示：共送检耳分泌物样本918份，623例(67.86%)培养结果为阳性。其中，仅检出细菌的有438例(70.30%)，仅检出真菌为164例(26.32%)，检出细菌合并真菌为21例(3.37%)。革兰氏阳性细菌以金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌为主，革兰氏阴性细菌以铜绿假单胞菌和流感嗜血杆菌为主。念珠菌以近平滑念珠菌和白念珠菌为主，丝状真菌以黄曲霉和黑曲霉为主。药敏试验结果发现，金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、氨基糖苷类及喹诺酮类抗生素较为敏感，而对青霉素和大环内酯类耐药率高。肺炎链球菌对青霉素、万古霉素、左氧氟沙星、阿莫西林/克拉维酸等的敏感性较高，而对大环内酯类、二代头孢的耐药率较高。阴性杆菌中，铜绿假单胞菌对青霉素类、头孢类、喹诺酮类及碳青霉烯类等均较为敏感。流感嗜血杆菌对阿莫西林/克拉维酸及氧氟沙星均敏感，对复方新诺明、氨苄西林及二代头孢部分耐药。念珠菌的药敏试验结果显示，近平滑念珠菌对三唑类抗真菌药敏感；白念珠菌对两性霉素B全敏感，对三唑类抗生素有一定的耐药性。本研究证实：南宁地区儿童耳炎感染的细菌主要为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌；真菌感染以近平滑念珠菌和黄曲霉为主。临床医生在治疗南宁地区儿童耳炎时，细菌性耳炎可经验性使用阿莫西林/克拉维酸或β-内酰胺类抗生素，真菌性耳炎可经验性使用伏立康唑治疗。

本文报道了空肠弯曲杆菌血流感染1例，并研究了其生物学特性与可能存在的耐药基因，为临床有效治疗相关疾病提供科学的实验室依据。采用常规方法、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析、测序分析和聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)等技术，对从1位老年女性血液中分离出的1株致病菌进行菌种鉴定、药物敏感试验、耐药基因检测等。结果显示，此分离菌株为空肠弯曲杆菌，其对环丙沙星、四环素耐药，对红霉素敏感。采用PCR检测出空肠弯曲杆菌的3种耐药基因gyrA、gyrB、tex(O)，可能与其药敏试验结果相关。

摘 要 目的 了解某三级医院耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的临床分布情况，及其检出率与碳青霉烯类抗菌药物DDDS相关性，为临床治疗、院感防控及合理用药提供参考依据。方法: 梳理2017-2021年本院分离的临床菌株，采用WHONET 5.6及SPSS 23.0 软件对数据进行分析。 结果 本院2017年至2021年间分离铜绿假单胞菌（PA）622株，其中CRPA 91株，检出率为14.63％。CRPA科室分布以呼吸与危重症医学科（31.87%）、重症医学科（23.08%）、神经外科（18.68%）为主。标本类型中，以痰和肺泡灌洗液为主，占81.32%，其次为伤口分泌物和尿液，分别占6.59%和5.49%。年龄分布以>80岁（25.27%）和60～80岁（29.67%）人群最多见。碳青霉烯类抗菌药物DDDS分析结果显示，2017年至2021年CRPA检出率与碳青霉烯类抗菌药物DDDs呈高度正相关（r=0.82 P=0.086）。临床科室中，神经外科CRPA检出率与碳青霉烯类抗菌药物DDDS呈正相关（r=0.78 P=0.122）。结论 本院所分离CRPA检出率与碳青霉烯类抗菌药物DDDS呈正相关，为避免常见感染菌和定植菌耐药的发生，应进一步加强抗菌药物管理，促进临床合理用药。

摘要：本研究旨在了解沙门菌分子特征，揭示其菌株间的亲缘关系，为沙门菌暴发溯源提供一定的依据。利用全基因组测序和生物信息学分析技术，筛选长春市近年来105株沙门菌的毒力基因与耐药基因，并对其进行全基因组单核苷酸多态性(whole genome single nucleotide polymorphism, wgSNP)分型、多位点序列分型(multilocus sequence typing, MLST)分型和全基因组多位点序列分型(complete genome multilocus sequence typing, cgMLST)分型。本研究分析了144个毒力基因，结果显示沙门氏菌毒力岛(Salmonella pathogenicity island, SPI)基因相对稳定，分泌系统外毒力因子随细菌血清型的不同，携带率相差较大；共筛选10 类69种耐药基因，氨基糖苷类（100%）、β-内酰胺酶类（73.33%）、磺胺类（72.38%）耐药基因携带率较高，大环内酯类（6.67%），林可酰胺类耐药基因（0.95%）携带率较低。105株沙门菌的cgST型别和MLST型别完全相同，分为13种，主要流行株肠炎沙门菌（ST11）和沙门菌I 4,[5],12:i:-（ST34）与国际流行株基本位于同一分支。本研究证实了长春市沙门菌携带较稳定的毒力基因及多重耐药基因，主要流行株在不同时间、来源中均有分布，二者分子特征与国外流行株一致，血清型与ST型、cgST型别密切相关。

寨卡病毒(Zika virus，ZIKV)为蚊媒传播病原体，感染该病毒可引起寨卡病毒病，目前尚无特异治疗药物。自噬是细胞维持自身稳态、促进胞内物质能量再利用的过程，但常被一些病毒劫持以促进自身复制。本研究以人肝癌细胞系Huh7为靶细胞，利用mTagRFP-mWasabi-LC3双荧光报告系统检测自噬体的形成；蛋白免疫印迹法检测细胞感染ZIKV不同时间后自噬标记蛋白LC3和P62的表达情况；用自噬抑制剂(渥曼青霉素、氯喹)、Beclin-1特异的短发夹RNA(short hairpin RNA，shRNA)和自噬激动剂雷帕霉素预处理细胞，再采用蛋白免疫印迹法和病毒空斑法检测其对病毒蛋白表达和胞外子代病毒含量的影响；采用蛋白免疫印迹法检测参与ZIKV感染自噬调节的信号通路。结果显示：ZIKV感染Huh7细胞后，LC3阳性自噬体的数量明显增多；自12 h开始，LC3-II的表达水平显著升高，P62蛋白表达水平在感染48 h后显著降低；两种自噬抑制剂处理和干扰Beclin-1表达均能有效抑制ZIKV感染和子代病毒的产生，而雷帕霉素处理增加了胞外子代病毒含量(P<0.05)；ZIKV感染增强了腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase，AMPK)和TSC2发生磷酸化，而哺乳动物雷帕霉素靶标(mammalian target of rapamycin，mTOR)的磷酸化水平下调。结果表明，ZIKV感染通过激活Huh7细胞中的AMPK/TSC2/mTOR信号通路诱导自噬，并利用自噬促进病毒复制和子代病毒的产生，这为研制以自噬相关分子为靶点的抗寨卡病毒药物提供了理论和实验依据。

1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type1，HSV-1)可以引起致命性的单纯疱疹病毒脑炎(herpes simplex virus encephalitis，HSE)，部分患者即使接受抗病毒治疗也会有严重的神经系统后遗症。有效抑制和清除HSV-1感染依赖于宿主的固有和适应性免疫反应，适应性免疫中T细胞的激活和调节起到主要作用，同时固有免疫也在抑制病毒复制和传播中起到重要作用。本文通过回顾HSE中免疫反应特征和机制的相关研究，对HSE中免疫系统对机体的保护和损伤作用进行了总结，为新的机制研究以及开发新的免疫疗法提供了思路。

本研究旨在评估大连医科大学医学微生物学课程线上教学效果，及时发现和总结线上教学中存在的问题，为教学课程改革提供依据。使用大连医科大学网络题库与考试评价系统对2021年参加医学微生物学课程线上学习和考试的641名学生的试卷进行分析，分析内容包括试卷各章节的正确率、难度系数、信度和区分度。结果显示，本次考试成绩呈正态分布，各章节正确率为70%～90%，考试平均分72.28，及格率85%，优秀率4%。试卷总体质量良好，难度略偏易，难度系数0.72。信度和区分度好，区分度0.29，信度为0.9。2021年线上教学与2019年线下教学的学生期末试卷成绩相比无显著性差异(P＞0.05)。本研究证实本次线上考试试卷总体质量良好，能够客观体现教学质量和学生学业水平，线上教学效果基本满意。本研究还比较了试卷中各题型的难度系数和区分度，为今后制定科学合理的线上考核试卷提供依据和参考。

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)是非细胞病变的病毒，其持续感染造成的肝脏损伤逐步引起肝脏炎症，进而导致肝纤维化、肝硬化，最终引发了80%的肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)。肝脏是机体代谢的重要器官，癌基因的异常活化以及抑癌基因的抑制失活会造成细胞代谢水平以及代谢方式的改变，此过程被称为细胞代谢重编程(metabolism reprogramming)，代谢重编程是肝脏炎症向癌症转化的关键步骤。本研究通过逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)、酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)、多重荧光免疫组化等方法检测HBV阳性细胞(或组织)与对照细胞(或组织)中脂质代谢关键基因的表达，在此基础上分析其功能和脂代谢的关系。结果显示，在稳定表达HBV的HepG2.2.15及HBsAg的Hep3B细胞中，脂代谢相关基因HMGCR、SREBP-2以及PSCK9的mRNA表达量显著上调，且在肝细胞癌患者的临床病理结果中相应蛋白表达水平也同步提高，提示HBV感染导致了相应代谢基因的高表达，且HBsAg是调控脂质代谢酶基因紊乱的关键蛋白。通过分析365例大样本肝癌患者的病理资料，本文发现脂代谢相关基因在肝癌组织中的高表达有预后变差的趋势，提示脂质代谢的紊乱可能是影响肝癌患者总生存期的危险因素。