根据本刊基础研究与临床医学、预防医学、实验诊断医学密切结合的特点,本期特别邀请了各路专家对中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)病毒学、临床表现和治疗原则、实验室诊断方法和注意事项,以及风险预测等进行了全面阐述。虽然目前MERS在韩国已被控制,我国也成功治愈了输入性患者,但MERS冠状病毒作为一种对全球有严重威胁的病原体,全面了解其致病机制、诊断与传播过程,并进行“解剖麻雀”式的回顾与解析,将会提高人们对突发传染病的防范意识与专业技能......
中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)是引起MERS的病原。本文就MERS-CoV的分类、特性、决定宿主特异性的分子结构及其疫苗研究状况和特异性药物研究进展等方面进行综述。
中东呼吸综合征(MERS)由中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染所致,感染者可并发急性呼吸窘迫综合征,严重者可发展为肾衰竭而死亡。该病自2012年世界卫生组织(WHO)首次报告以来,在沙特阿拉伯等20多个国家时有发生,对全球公共卫生构成重大威胁。本文对MERS相关临床特征进行综述,以期对该病的发生和流行及早诊治和防控。
中东呼吸综合征(MERS)是一种由中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)感染所致的急性呼吸道传染病,其临床诊断需依据实验室病原学检测结果。本文就MERSCoV的核酸检测、抗原和抗体检测、病毒分离鉴定及基因变异监测等方面的最新研究进展作一综述。
本研究通过同源建模方法,模拟结核分枝杆菌H37Rv来源的吲哚-3-甘油磷酸合成酶(IGPS)的结构,采用分子对接法,以IGPS结构为基础,从包含60 000种化合物的Maybridge化合物库中筛选出能与IGPS活性中心良好结合的化合物,并用抑菌实验等生物学方法进行验证。结果表明,化合物ATB26能与IGPS很好结合,且能体外有效抑制H37Rv和临床分离的敏感和耐药菌株的生长,其对结核分枝杆菌的体外最低抑菌浓度约为0.1 μg/ml。细胞毒性实验表明,ATB26与临床常用抗结核药物异烟肼、乙胺丁醇类似,对THP1细胞系毒性较小。结果提示,化合物ATB26是一个新型IGPS抑制剂,有望开发成为新型的抗结核药,也可作为新型抗结核药物开发的一个潜在靶点。
分枝杆菌细胞壁含丰富的脂质组分,其中一些具有抗原性,或具有重要的免疫调节作用。为探讨这些脂质组分在结核分枝杆菌亚单位疫苗中的作用,研发有效疫苗,本研究对卡介苗(BCG)细胞壁总脂成分进行萃取,用硅胶柱色谱法将其分离为非极性脂、中间极性脂和极性脂,检测各类脂质组分在人群中的免疫原性,并将总脂和各类脂质组分分别与佐剂二甲基三十六烷基铵(DDA)和Poly(I:C)混合,进一步与结核分枝杆菌融合蛋白LT70(ESAT6-Ag85B-MPT64<190-198>Mtb8.4Rv2626c)混合,构建含脂质的结核分枝杆菌亚单位疫苗。在小鼠BCG攻击模型中进行保护效率评价,包括BCG初免后含脂质亚单位疫苗的强化免疫保护效率评价。结果显示,结核病患者脂质特异性抗体IgG高于健康人群(P<0.05)。在小鼠BCG攻击模型免疫保护效果评价中,含脂质亚单位疫苗LT70总脂组小鼠肺部的荷菌数显著低于BCG组(P<0.05)。在BCG初免含脂质亚单位疫苗加强免疫策略中,LT70总脂和LT70中间极性脂组小鼠肺部荷菌数均低于BCG组(P<0.01)和LT70组(P<0.05)。研究表明,分枝杆菌脂质成分具有较强的免疫原性,与亚单位疫苗联合使用能增强亚单位疫苗的抗结核分枝杆菌效果。其中,中间极性脂类强化作用明显,值得深入研究。
为探究结核分枝杆菌脯氨酸脯氨酸谷氨酸(PPE)蛋白家族Rv3425的生物学功能,利用免疫共沉淀联合质谱分析,在卡介苗(BCG)中筛选与Rv3425相互作用的蛋白。首先,以聚合酶链反应(PCR)扩增获得Rv3425基因,并克隆于pMV261载体。将重组载体转化入BCG,裂解细胞,蛋白免疫印迹法证实目的蛋白可在BCG中表达。通过免疫共沉淀,用特异抗体分离出BCG中的Rv3425蛋白复合体,质谱鉴定其成分,在美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库中检索各蛋白的功能,筛选与Rv3425相互作用的蛋白,并用谷胱甘肽S转移酶(GST) pulldown验证。结果显示,免疫共沉淀联合质谱分析筛选到10个与Rv3425 相互作用的蛋白,在细胞内Rv3425协同作用下参与肽聚糖合成途径、分枝菌酸合成途径、ESX1蛋白分泌系统及细菌毒力调控。GST pulldown验证发现Rv3614c与Rv3425可体外结合。本研究证实Rv3425与Rv3614c存在相互作用,Rv3425可能与ESX1蛋白分泌系统及结核分枝杆菌致病机制密切相关。
本研究旨在通过分离粪肠球菌裂解性噬菌体并分析其生物学特性,为噬菌体疗法应用于肠球菌感染提供依据。以粪肠球菌为宿主菌,用双层琼脂法从环境污水中分离出1株裂解性噬菌体(命名为φEn-ZZ8),对其生物学特性进行初步分析。透射电镜观察发现,φEn-ZZ8头部呈二十面体立体对称,直径约40 nm;尾部呈丝状,长约200 nm。吸附实验表明,在10 min内超过90%的噬菌体可吸附至宿主菌细胞。一步生长曲线显示,φEn-ZZ8的潜伏期为15 min,爆发期为40 min,爆发量为150 pfu/cell。φEn-ZZ8基因组对内切酶Hind Ⅲ、EcoR Ⅴ、NdeⅠ、PstⅠ、XbaⅠ和SacⅡ敏感;基因组大小约为42 kb。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳至少可见14条蛋白带,相对分子质量为10 000~130 000。φEn-ZZ8对26株粪肠球菌的裂解率达30.8%,其裂解活性在pH 5~8和50~70 ℃条件下仍稳定。结果提示,φEn-ZZ8是一种裂解性强、裂解谱较宽、对温度具有耐受性的裂解性噬菌体,有望成为抗耐药性肠球菌感染的噬菌体生物制剂。
随着现代医学的发展,抗真菌药物广泛应用,白假丝酵母(又称白念珠菌)耐药现象日益严重。由酵母相转变为菌丝相是白念珠菌致病的一个必要过程,抑制菌丝形成可控制其感染。细菌群体感应信号分子BDSF(顺十二碳-2-烯酸)可抑制这一形态的转变,从而抑制白念珠菌的致病力。本研究检测BDSF对60株白念珠菌临床菌株的抑菌丝效果,同时测定这60株临床菌株对氟康唑的敏感度。结果显示,60株临床菌株中8株(13.3%)对氟康唑耐药,最低抑菌浓度(MIC)≥64 μg/ml,而BDSF对耐与不耐氟康唑的临床菌株均能高效抑制菌丝生长。结果表明,BDSF可作为临床治疗白念珠菌感染的新型候选药物,值得进一步研究。
乳腺癌是全球发病率最高的女性恶性肿瘤。近年来,病毒感染与乳腺癌发生的相关性研究受到关注。人乳头瘤病毒和Epstein-Barr病毒等多种病毒均在乳腺癌组织中被检出,相关机制研究也支持病毒感染与乳腺癌发生相关这一观点。但目前流行病学研究数据差异较大,对两者相关性的认识存在较大争议。本文总结了相关研究的进展,并分析了目前研究中存在的主要瓶颈问题。
幽门螺杆菌是具有高感染率的慢性感染性致病菌,与儿童慢性胃炎、消化不良、不明原因缺铁性贫血及儿童生长发育迟缓等疾病相关,给患儿的健康带来极大危害,且大部分成人幽门螺杆菌感染也是在儿童期获得。因此,寻求一种适合儿童的、便捷的幽门螺杆菌检测方法十分必要。目前常用的检测方法包括快速尿素酶试验、组织切片染色、胃黏膜细菌培养、尿素呼气试验、血清抗幽门螺杆菌抗体检测、幽门螺杆菌粪便抗原检测等。临床上应根据不同的检测目的,选择不同的检测方法。本文就目前儿童幽门螺杆菌检测方法作一综述,比较分析多种检测方法的效果。
医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室 上海市公共卫生临床中心 复旦大学 万方数据 中国知网 维普资讯