近年来，病原微生物实验室的生物安全备受关注，突如其来的新冠肺炎疫情更是让“生物安全”成为焦点话题。《中华人民共和国生物安全法》^[1]在2021年4月15日正式颁布实施，标志着我国生物安全已经正式进入依法治理的新高度。在《生物安全法》中，病原微生物实验室生物安全独立成章，是做好其他生物安全工作的重要基础保障^[2-3]。在新型冠状病毒肺炎疫情防控工作中，疾病预防控制(简称疾控)机构承担了病毒核酸检测、病毒全基因测序等关键工作，成为疫情防控的“重要战场”。过去对病原微生物实验室的生物安全要求是制定完整的管理制度，配置生物安全柜、压力灭菌器等设备，配备足够的实验人员以满足实验需要。严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型(severe acute respiratory syndrome coronavirus type 2，SARS-CoV-2)(简称新冠病毒)属于高致病性病原微生物，其大规模人群筛查、核酸检测等工作需要在BSL-2实验室内进行，因此更须提高生物安全管理的软件水平，包括对管理制度要求具有可操作性，对设施设备增加了运行管理的标准，对实验人员的要求从数量足够转为素质能力达标，对实验过程的管理更加具体精准。为了规范疾控机构的病原微生物管理，有效防止生物安全事件的发生，提升上海市新冠肺炎疫情防控工作的效能，上海市疾控中心组织对上海市区级疾控机构病原微生物实验室进行现场监督检查。本次研究主要针对各实验室生物安全的现况和存在的问题，提出解决方案及相应的对策。

1 对象和方法 1.1 研究对象

2021年上海市疾控中心对上海市全市范围内的区级疾控机构的病原微生物实验室开展了生物安全检查，依据生物安全二级实验室备案情况和新冠检测实验室设立情况，选取16个区疾控机构的病原微生物实验室进行现场检查，监督检查2020年以来开展新冠病毒核酸检测的记录档案。

1.2 研究方法 1.2.1 依据

制定现场检查表，依据《中华人民共和国生物安全法》^[1]、《病原微生物实验室生物安全管理条例》(国务院令第424号)^[4]、《病原微生物实验室生物安全通用准则》(WS233-2017)^[5]、《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2008)^[6]等法规和标准，抓取核心要素，设定指标，从而制定现场检查表。

1.2.2 检查内容

包括实验室环境及设施设备配备运行情况和实验室生物安全管理实施情况两方面，其中实验室环境及设施设备配备运行情况包含9个指标，实验室生物安全管理制度及实施情况共分为管理制度、人员管理、实验过程管理3个大项，包含23个指标。检查内容包含实验室现场检查、调阅档案资料、实验室人员面试。其中，档案资料包括实验室现行有效的规章制度、2020—2021年已归档记录表单、实验室监测视频等。

1.2.3 检查形式

由市级疾控中心组建检查组，分别选取生物安全管理、病原微生物检测领域专家组成检查组。检查组对被检查实验室进行现场检查，现场查验完成后填写现场检查表。

1.3 数据分析

采用双人录入、3次交叉核对的方式对各实验室数据进行录入，使用Excel 2007软件进行整理分析。

2 结果 2.1 实验室环境及设施设备配备运行情况

对16家实验室进行现场检查，结果如表 1所示。16家疾控机构的实验室环境检查6项指标的符合率均为100%。实验室设施设备配备检查中发现：闭门器运行的符合率为93.75%，有1家机构存在使用重物卡门的情况；高压灭菌器和洗眼器运行维护的符合率均为87.50%，有2家实验室存在洗眼器无水流和高压灭菌器年检超期的情况；有4家新冠核酸检测的实验室由普通微生物实验改造而成，不能完成清洁通道和污物通道，人流、物流和样品流的完全分割，符合率仅为75.00%。

2.2 实验室生物安全管理执行情况

对16家实验室的制度管理、人员管理、实验过程管理进行核查，结果如表 2所示。制度管理的8项指标中7项指标符合率为100%，菌毒种储藏和阳性生物样本管理的符合率为93.75%，有1家实验室存在单一人员管理菌毒种库的情况。

人员管理包括2类共8项，分别为人员素质5项和个人防护3项。人员素质中有3项符合率为100%；有1家实验室的检测人员在实验室内穿着不符合要求，脚趾裸露无保护；有1家实验室的检测人员新冠疫苗接种率未全覆盖。个人防护3项中有1项指标符合率为100%，其余2项符合率均超过80%；有3家实验室未按照不同人员的防护要求穿戴相适应的防护用品，而是所有人员采取相同的防护用品；有2家实验室防护用品穿脱流程不符合《国家卫生健康委办公厅关于印发新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》^[7]的要求。

实验过程管理包括消毒灭菌3项、废弃物处置4项。消毒灭菌的3项指标符合率均超过80%，有1家实验室消毒记录不完整，有2家实验室未按照标准化操作流程(standard operating procedure，SOP)浓度要求配制含氯消毒剂，或将同一份消毒预案运用在检测、送样、筛查、流调等各个工作场景。废弃物处置的4项指标中利器盒使用的符合率为100%。废水处置余氯监测的符合率最低，为62.50%，有6家实验室未将废水处置余氯指标列入常规监测指标，其余指标符合率超过80%，有1家实验室将检测人员的个人防护用品按医疗废弃物处置，后勤保障人员、废弃物处理人员的防护用品作为普通垃圾处理，有2家实验室选择了易刺穿的塑料袋作为废弃枪头的包装袋。

3 讨论 3.1 设施设备应统一管理

本次研究发现，上海市疾控机构实验室均按照《病原微生物实验室生物安全通用准则》中对生物安全二级实验室的要求配备压力蒸汽灭菌器、生物安全柜、闭门器、洗眼器等生物安全实验室常用设备，同时配置消防器材等突发应急处置设备。这与中部和西部地区的二级实验室情况基本一致^[8-10]，同时发现实验室内不同仪器设备的维护和运行管理存在差距。生物安全柜和紫外灯等设备由检测人员负责管理维护，高压灭菌器由废弃物处置人员管理维护，洗眼器由后勤保障人员管理维护，其中生物安全柜和紫外灯的维护情况较好，能做到设备档案细致，检定、使用、维护记录完整；高压灭菌器处于有人使用维修缺乏记录的状态，洗眼器在检测过程中使用频率极低，这历来是实验室管理的难点^[11]。本次现场检查发现有洗眼器流出黄锈水，甚至未接水管等现象，造成严重的生物安全隐患。不同的人员对仪器管理的认知不同，反映出实验室内人员生物安全意识的参差，对于实验室内的仪器设备须设专人负责统一管理。

3.2 风险评估后需有可行的应对措施

自开展新冠核酸检测工作以来，生物安全二级实验室为了防范生物安全风险，普遍进行了风险识别，包括样本采集运输、个人防护、废弃物处置、突发应急情况处置等环节。本次研究发现，各实验室编制的风险评估报告中只有风险识别的过程，缺少风险的控制措施，同时未对风险进行分级。面对高、中、低不同等及风险的事件时运用相同的处置预案，致使所编制的处置预案的可操作性较弱。风险评估是实验室生物安全管理的基础，应急预案是突发应急事件发生时的操作手册，徒有形式的应急预案非但不能消除风险，可能导致风险升级。

3.3 “三废”处置应全流程管理

废弃物处置工作对工作人员的学历和技术要求低，多由工人或外包人员担任，此现象由来已久^[12-13]。疾控机构的实验室承担了大规模人群的新冠病毒核酸筛查工作，大量的新冠病毒核酸样本引发废弃物处置的思考，需要在实验室内部形成废弃物处置的流程，从高压灭菌器的维护使用、操作人员的培训、包装容器的选择、废弃物出入库记录的填写等环节入手，交由实验室负责人垂直管理，形成废弃物处置的闭环管理。本次研究发现，实验室在废弃物、废水、个人防护用品的处置上都存在疏漏，尤其是疏忽了废水处置余氯监测，无法确认废水消毒效果，造成重大的生物安全隐患。

如今的疾控机构不缺少制度，但缺少分级管理的理念，要从制定“大而全”的管理框架逐渐转化为制定“小而精细”的管理体系，针对不同的实验室场景和不同的实验室角色，进行不同级别的个人防护，制定不同的消毒预案，建立不同纬度的台账，从而确保实验室安全有序地运行。