2024年, 第19卷, 第3期　
刊出日期：2024-06-25

  

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论著
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  铜绿假单胞菌在常规培养与美罗培南压力下培养产生的外膜囊泡表征差异分析

  甘奕箫 李梦雪 王志成

  微生物与感染. 2024, 19(3): 129-139.

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  本研究旨在通过透射电子显微镜、液相色谱-质谱联用多种技术手段分析铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa , P.aeruginosa）在正常培养条件以及美罗培南刺激下产生的外膜囊泡（OMV，Outer membrane Vesicle）的物理表征和蛋白质成分的区别。同时体外培养小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞与OMV共孵育48小时后的多种炎性细胞因子的分泌情况。结果显示，一定浓度的美罗培南（Meropenem，MEM）压力培养下P.aeruginosa产生的OMV（MEM-OMV）在形态和尺寸上与正常培养产生的OMV（Normal-OMV）相比无明显变化，但是同样的培养时间下，MEM-OMV的离子浓度显著高于Normal-OMV（20±0.53×108/mL vs 1.50±0.76×108/mL）。蛋白质组学分析显示，两种OMV的蛋白质表达也有差异，MEM-OMV中与外排泵相关的MexA和MexB更多。细胞实验结果表明，MEM-OMV能够比Normal-OMV刺激Raw264.7细胞产生更高浓度的IL-6、TNF-α、IL-8和IFN-γ。综上，美罗培南的加入能够改变P.aeruginosa分泌OMV的产率、内含蛋白质以及对巨噬细胞的免疫刺激作用。
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  2022—2023年上海青浦社区流浪猫狂犬病、弓形虫和A型流感病毒的流行病学调查

  王曲直

  微生物与感染. 2024, 19(3): 140-145.

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  本研究旨在了解和掌握狂犬病、弓形虫和A型流感在社区流浪猫中的免疫和流行状况，为社区流浪猫人兽共患病公共卫生防控提供依据。采用实时荧光聚合酶链式反应（PCR）检测流浪猫全血样本中弓形虫核酸，以及咽喉和肛门拭子样本中流感病毒核酸。本研究对2022年6月至2023年8月在上海青浦地区40个小区采集的153只流浪猫血清样品开展狂犬病、弓形虫和A型流感病毒抗体检测，并对A型流感抗体阳性样品开展H3、H5、H7和H9分型鉴定。结果显示153份流浪猫血清样品狂犬病、弓形虫和A型流感抗体阳性率分别为14.38%（22/153）、11.76%（18/153）和3.92%（6/153）。春季（3-5月）和夏季（6-8月）弓形虫血清抗体阳性率差异极显著。检出H3亚型抗体阳性样品1份，阳性率0.65%（1/153）。研究表明上海地区流浪猫狂犬病免疫抗体水平不足以阻断狂犬病病毒传播。流浪猫群体存在弓形虫感染，尤其在夏季传播风险更高。流浪猫存在A型流感病毒感染，提示流浪猫可以成为人和动物流感病毒的“混合器”，造成人兽共患病传播风险。因此，有必要对流浪猫群体开展狂犬病、弓形虫、A型流感病毒感染情况持续监测，为科学防控提供依据。
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  液滴数字PCR在临床上诊断血流感染的应用评估

  王强 仝欢 饶桂华 赵芳 姜丽静 陈明亮

  微生物与感染. 2024, 19(3): 146-156.

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  【摘要】 目的 血流感染的死亡率和致残率较高，每年的死亡病例数可达800万，准确及时的病原学诊断至关重要。本研究的目的是评估液滴数字PCR（droplet digital PCR，ddPCR）在诊断血流感染的应用价值。方法 作为一项前瞻性研究，2021-2023年收集了55例疑似血流感染患者的血浆，将液滴数字PCR检测（3小时左右）与传统的血培养（blood culture，BC；最快48小时左右）结果进行比较。结果 ddPCR敏感性和阴性预测值较高，达到69.2%和90%，阳性率为70%，显著高于血培养。在ddPCR+/BC+组中，ddPCR检测出的病原菌的基因拷贝数与降钙素原、C反应蛋白、白细胞呈同步变化趋势；不过ddPCR阳性与血浆中的炎性因子降钙素原、C反应蛋白、白细胞没有显著相关性。通过药敏试验发现了6株碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌，ddPCR全部从相应标本检测出丝氨酸酶（blaKPC）或者金属酶（blaNDM和blaIMP）；分离出3株耐甲氧西林葡萄球菌的标本亦全部检测出mecA基因，ddPCR还从未培养出细菌的9份标本中检出耐药基因。结论 液滴数字PCR是一种快速的病原体的检测手段，可作为传统血培养的附加补充，与临床患者的症状相结合，可以快速诊断可疑的血流感染病例，同时对耐药基因的检测亦有潜在的优势。
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  上海市区级疾控病原微生物实验室生物安全现状

  张慧君 邵晶 沈小明 薛慈玲 李崇山

  微生物与感染. 2024, 19(3): 157-161.

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  本研究旨在了解上海市疾控机构病原微生物实验室的现况，对实验室的生物安全状况进行分析，为进一步加强和规范上海市实验室生物安全管理提出对策建议。采用现场调查的方式对上海市16家区级疾控机构的病原微生物实验室生物安全状况进行调查。发现实验室设施设备配备及运行指标中，生物安全柜、高压灭菌器、洗眼器、紫外灯的配置率达到100%；设备运行维护指标中，生物安全柜和紫外灯维护情况较好，洗眼器和高压灭菌器的维护合格率为87.50%；生物安全管理制度的实施指标中，管理制度的指标完成较好，人员管理和实验过程管理的指标还需提升，废水处置余氯监测值指标符合率低于80%。结果显示上海市疾控机构病原微生物实验室在生物安全制度建立、实验室责任落实等环节完成得较好，在废弃物处置、设施设备管理、应急预案制度等方面还需要进一步完善和提高。
病例分析
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  1例支气管戈登菌引起的肿瘤患者导管相关性血流感染

  党秀敏 王群 肖敏 张晓煜 谢争华 张丽

  微生物与感染. 2024, 19(3): 162-168.

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  摘要：目的 分析肿瘤患者导管相关血流感染(CLABSI)支气管戈登菌的分离鉴定及药敏特点，为临床治疗该菌引起的感染性疾病提供参考。方法 采集1例子宫内膜癌患者放疗后分别经静脉导管和外周静脉留取的血培养阳性标本，同时采用VITEK MS全自动微生物质谱检测系统和分子测序技术对该分离株进行鉴定分析,并参照诺卡菌和其他需氧放线菌药敏试验标准进行药敏试验。结果 静脉导管血需氧瓶和外周静脉血需氧瓶孵育48h后阳性报警，涂片见革兰阳性杆菌。血琼脂平板上培养24h，生长不溶血白色粗糙干燥菌落，培养至48h，白色粗糙干燥菌落转变为橘黄色粗糙干燥菌落。VITEK MS质谱仪和16S rRNA测序技术均鉴定为支气管戈登菌（Gordonia bronchialis），药敏结果表明该菌对万古霉素、头孢曲松、头孢吡肟、环丙沙星、亚胺培南、美罗培南、利奈唑胺、复方新诺明敏感。 结论 本研究报告了支气管戈登菌的生物学特征和病例的诊疗过程，尽管该菌在环境中很常见，但与人类疾病相关的案例相对较少。与所有微生物感染一样，对于疑似或确诊的支气管戈登菌感染，应该进行及时的诊断和治疗。
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  儿童急性B淋巴细胞白血病合并鼻眶脑型毛霉菌病1例报告并文献复习

  张衡璐

  微生物与感染. 2024, 19(3): 169-176.

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  摘要 目的：提高对儿童白血病化疗后合并鼻眶脑型毛霉菌感染的认识。方法：回顾分析1例急性B淋巴细胞性白血病（B-ALL）患儿诱导化疗期间合并鼻眶脑型毛霉菌病的临床资料，并复习相关文献。结果：3岁女童，确诊B-ALL，诱导化疗期间反复发热，前后出现眼睑肿胀、鼻出血、上睑下垂、视物不清，行鼻腔镜检查、分泌物培养及头颅核磁增强等检查，诊断为鼻眶脑型毛霉菌病，给予两性霉素B脂质体静点、泊沙康唑口服、两性霉素B鞘内注射抗真菌治疗，感染得到有效控制。结论：毛霉菌是一种条件致病性真菌，多见于免疫力低下的患者，毛霉菌通过鼻腔和呼吸道进入，可侵入鼻窦和眼眶，引起坏死性炎症和肉芽肿；也可直接或经血流侵入脑部，引起颅内感染。本病发病急，病情进展快，诊断困难，死亡率高。以两性霉素B制剂为主导的药物及手术联合治疗有助于改善预后。
综述
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  从效应蛋白多样性看革兰氏阳性菌Ⅶ型分泌系统功能多样性

  张旸 王德禹 吴旸

  微生物与感染. 2024, 19(3): 177-185.

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  Ⅶ型分泌系统（Type VII secretion system, T7SS）是唯一一种仅存在于革兰氏阳性细菌中的分泌系统。T7SS在细菌与细菌、细菌与宿主、细菌与环境相互作用中发挥着重要功能，与细菌的生长和致病性密切相关。T7SS的功能多样性与其所分泌的效应蛋白的多样性密切相关。因此，本文将围绕T7SS所分泌的效应蛋白展开讨论，对效应蛋白的结构和功能、分泌机制及其基因转录水平的调控方式等多方面进行综述，以期为进一步研究细菌的T7SS提供新的思路。
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  耐药菌共定植及定植菌相互作用的研究进展

  关云艳 王倩

  微生物与感染. 2024, 19(3): 186-192.

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  【摘要】微生物共定植与共感染的发生、发展及持续具有相关性，共定植的微生物通常能使其对抗菌药物耐药性及对机体致病性增加，因而这成为临床医生面临的一个难题，但共定植微生物之间的相互作用是非常复杂的，不同的微生物之间影响方式不同，并且可随着定植时间的不同而发生改变。本文对临床上常见耐药菌共定植检出情况、发生的危险因素以及定植菌之间的相互作用做一概述。