摘要
目的 研究戊型肝炎病毒(HEV)第Ⅳ基因型中国株开放阅读框架(ORF)2编码蛋白p166Chn的抗原表位特征.方法 制备HEV ORF2重组衣壳蛋白p166Chn的特异性单克隆抗体(McAb),进行中和活性鉴定,并利用7种HEV不同基因型p166重组蛋白以及22种N端或C端逐步截短的p166Chn进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,确定McAb所识别抗原表位的性质和位置.结果 获得1株稳定分泌HEV McAb的杂交瘤细胞株,命名为B4.该McAb不与其他基因型p166重组蛋白反应,不能中和HEV对培养细胞的感染性,也不能竞争抑制已知中和性McAb与抗原p166Chn的结合,表明McAb B4所针对的抗原表位是HEV第Ⅳ基因型特异的非中和性抗原表位.此外,McAb B4能与截短蛋白pN452、pN460、pN462、pN463、pN464、pN465、pN466、pN468、pN470和pN472发生阳性反应,而与pN482、pN492、pC587、pC597、pC599、pC600、pC601、pC603、pC605、pC607、pN465-C601和pN460-C605均不反应.表明其可识别的抗原表位位于472～617位氨基酸,而且N端第472～482位氨基酸以及C端第607～617位氨基酸的1个或多个氨基酸对构成该抗原表位起着重要作用.结论 所发现的HEV第Ⅳ基因型特异性抗原表位是1个非中和性的构象依赖性表位,可定位于pORF2的第472～617位氨基酸.
关键词
抗原表位 /
单克隆抗体 /
基因型
Key words
Hepatitis E virus /
Antigenic epitope /
Monoclonal antibody /
Genotype /
汪源1 ; 梁久红1 ; 董晨1 ; 田华1 ; 戴星2 ; 赵宇1 ; 孟继鸿1.
戊型肝炎病毒第Ⅳ基因型特异性抗原表位的鉴定与定位
[J]. 微生物与感染. 2006, 1(3): 149-152
WANG Yuan1; LIANG Jiu-hong1; DONG Chen1; TIAN Hua1; DAI Xing2; ZHAO Yu1; MENG Ji-hong1.
Identification and localization of a specific antigenic epitope of the Hepatitis E virus genotype Ⅳ[J]. Journal of Microbes and Infections. 2006, 1(3): 149-152
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