BrdU标记的人巨细胞病毒感染HEL细胞的方法学研究
傅鹰; 陈利玉; 罗敏华; 李建华; 杨滔
1中南大学湘雅医学院微生物学教研室,长沙 410078
2Dept.of Microbiology University of Idaho Moscow, ID 83844, USA
Research on the use of BrdU to track HCMV infection in HEL cells
FU Ying CHEN Li-yu LUO Min-hua~* LI Jian-hua YANG Tao
1Department of Microbiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;
2Department of Microbiology; University of Idaho; Moscow; ID83844; USA
摘要: 目的 以标记在人巨细胞病毒(HCMV)DNA上的BrdU为示踪剂,研究病毒在受染HEL细胞中的移动过程;同时结合病毒蛋白pp65的表达探讨病毒复制、增殖的过程。方法 以BrdU标记的HCMV(MOI=4)感染HEL细胞,分别选取感染后2h、4h、6h、24h及48h 5个时间点的细胞,用抗BrdU单克隆抗体,研究病毒核酸的胞内定位;同时用抗HCMV蛋白pp65的单克隆抗体检测此蛋白的表达及分布。结果 免疫细胞荧光染色结果提示:在感染5个时间点,病毒DNA依次位于胞质、胞核及同时位于胞核和胞质;蛋白pp65的表达及分布规律为:胞内无表达、胞核分布、胞核与胞质同时分布及巨细胞和融合细胞内分布。结论 以BrdU为标记物标记双链DNA病毒核酸不仅为研究HCMV.的胞内移动提供了良好的模型,同时也为其他病毒的研究提供了良好的工具;本实验结合HCMV蛋白pp65的表达和分布直观地反应了HCMV感染HEL细胞并在其中复制、增殖的过程。
关键词 :
BrdU ,
HEL细胞 ,
pp65
Key words :
Human cytomegalovirus
BrdU
HEL cells
pp65
引用本文:
傅鹰; 陈利玉; 罗敏华; 李建华; 杨滔. BrdU标记的人巨细胞病毒感染HEL细胞的方法学研究[J]. 微生物与感染
, 2006, 1(2): 91-94 .
FU Ying CHEN Li-yu LUO Min-hua~* LI Jian-hua YANG Tao . Research on the use of BrdU to track HCMV infection in HEL cells. Journal of Microbes and Infections, 2006, 1(2): 91-94 .
链接本文:
http://jmi.fudan.edu.cn/CN/ 或 http://jmi.fudan.edu.cn/CN/Y2006/V1/I2/91