目的 联合使用一种新的表达Epstein Barr病毒(EBV)裂解性复制极早期基因Rta的杆状病毒载体及抗病毒药物更昔洛韦,试验其对激活鼻咽癌细胞中潜伏性EBV的复制和杀伤肿瘤细胞的作用。方法 用携带EBV的复制起点OriP和CMV启动子表达Rta基因的重组杆状病毒处理EBV潜伏感染的鼻咽癌细胞Hone1-EBV,和由该细胞系建立的裸鼠肿瘤模型,同时联合使用更昔洛韦,研究细胞和肿瘤生长的情况。结果 重组杆状病毒和更昔洛韦联合处理肿瘤细胞后,细胞生长活性仅为对照的51%,裸鼠活体实验中肿瘤生长也受到明显的抑制,10 d后瘤体积仅为对照的20%,瘤重仅为对照的30%。组织化学分析证实大量肿瘤细胞坏死。结论 杆状病毒载体与更昔洛韦联合可以用于EBV相关的鼻咽癌的治疗。
目的 研究对免疫复合物型治疗性乙肝疫苗不同应答乙肝患者的乙肝病毒基因型有无差别。方法 收集67例经60 ug HBsAg-HBIG (YIC) 治疗的慢性乙肝患者血清, 用S基因聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法对其进行HBV基因分型,并结合患者对YIC治疗的不同应答进行分析。结果67例感染乙肝病毒(HBV)患者中,HBV B基因型22例,C基因型43例,未确定者2例。感染HBV B, C 两种基因型的患者对YIC免疫治疗的病毒学与HBeAg的血清转换应答差异无统计学意义. 结论HBV B或C基因型不影响慢性乙肝患者对YIC的治疗应答。
目的 探讨高效的表皮葡萄球菌基因删除突变株构建方法。方法 分别应用2种不同的穿梭质粒pMAD和pBT2,连接目的基因表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS、saeRS和lytS的上下游片段,构建重组质粒,电转入金黄色葡萄球菌RN4220后转入表皮葡萄球菌1457,利用抗性和生物标志筛选出针对特定目的基因的突变株SE1457-ΔarlS、SE1457-ΔsaeRS和SE1457-ΔlytS,比较2种方法的优、缺点。结果 利用pMAD和pBT2分别构建基因删除同源重组质粒pMAD-ΔsaeRS、pBT2-ΔarlS和pBT2-ΔlytS,并均获得相应的表皮葡萄球菌基因删除突变株。在筛选过程中,以pMAD为载体构建基因删除突变株,仅需1轮抗性/蓝白斑筛选过程即获突变株;而以pBT2为载体构建基因删除突变株筛选方法,需经过5~10轮的筛选才可获得突变株。基因删除突变株经聚合酶链反应(PCR)和测序等鉴定确认。与野生株相比,SE1457-ΔarlS突变株的生物膜形成能力降低90.96%,而SE1457-ΔsaeRS和SE1457-ΔlytS株的生物膜形成能力略有增加。结论 以pMAD载体构建表皮葡萄球菌突变株比较快速和简便。
目的 克隆HHV-6特异性CD4+ T细胞,并分析其基本特征。方法 微孔有限稀释法克隆HHV-6特异性CD4+ T细胞;3H-TdR掺入法细胞增殖试验筛选HHV-6 特异性CD4+ T细胞克隆;FACS分析HHV-6特异性CD4+ T细胞克隆的表面标志;ELISA检测HHV-6特异性CD4+ T细胞克隆的细胞因子分泌水平。结果 获得的细胞克隆中有4株以HHV-6感染细胞裂解物特异的方式增殖,并且其增殖水平与HHV-6感染细胞裂解物呈剂量依赖性;细胞克隆表面标志为CD3+CD4+;W-2和W-4细胞克隆的细胞因子分泌以IL-10为主,W-1细胞克隆的细胞因子分泌以IL-10及IFN-γ为主,W-3细胞克隆的细胞因子分泌以IFN-γ为主。结论 初步建立HHV-6特异性CD4+ T细胞克隆,并分析其表面标志和细胞因子分泌水平,为HHV-6特异性Treg细胞的克隆、筛选及其功能的研究奠定基础。
目的 寻找对结核性胸水高敏感、高特异性而又简单的检查方法。方法 采用比色法和ELISA法对50例结核性胸水腺苷脱氨酶(ADA)和结核抗体水平进行了检测,并以45例恶性胸水和30例右心功能不全引起的胸水作对照。结果 结核性胸水ADA和结核抗体水平显著高于对照组(P<0.01)。以ADA>45U/L作为阳性标准,其对结核性胸水的敏感性为100%,特异性为98.6%,准确性为99.2%;结核抗体对结核性胸水的敏感性为90%,特异性为93.3%,准确性为92%。 结论 ADA 和结核抗体对诊断结核性胸水均有重要价值。在使用抗结核药特别是在并用激素治疗后,胸水ADA及结核抗体水平会随之下降,故应在停药1周后检测并动态观察二者的变化
目的 了解我院NICU内鲍曼氏不动杆菌感染呼吸机相关肺炎的情况,探讨有效预防和控制的该类感染的措施。方法 收集我院NICU内2006.1-2007.2之间发生呼吸相关肺炎病通过细菌培养确定为鲍曼氏不动杆菌感染的患儿的临床资料以及该菌的药敏试验结果进行分析。结果 鲍曼氏不动杆菌是呼吸机相关肺炎的主要致病菌之一,其流行情况复杂,并且出现了耐碳青酶烯类的菌株感染,可造成严重的不良后果。结论 预防该菌在NICU内导致感染需要引起临床工作者更多的重视,加强对其定植情况的监测是预防其感染和流行的重要措施,对该菌开展及分子流行病学的深入研究将有助于指导NICU内NI防治。