ISSN 1673-6184 CN 31-1966/R
由于历史原因和结核病的特殊性，中国是世界上紧随印度之后的22个结核病高负担国家之一。结核分枝杆菌感染严重危害人类健康，影响经济发展。2015年世界卫生组织提出终止结核病流行的目标：2030年结核病死亡率降低90%，发病率降低80%；2035年结核病死亡率降低95%，发病率降低90%，即达到目前结核低发病率国家的水平。鉴于我国人口众多，流动性大，且结核分枝杆菌高度传染(1人可传10～15人)，我国对结核病的防控要达到世界卫生组织提出的终止结核病流行的目标还有很艰难的路要走。本期围绕结核病疫苗的有关问题，从不同角度发表了数篇观点不同的文章......
本文针对以卡介苗(bacillus Calmette-Guérin，BCG)为基础的结核分枝杆菌新疫苗本身的缺陷问题、临床前药效学评价面临的问题、临床研究可能面临的有效性评价问题及伦理问题等，对“新一代抗结核分枝杆菌疫苗将会建立在现用BCG的基础上”的观点进行评述。认为以BCG为基础的新疫苗保护力可能超过现用BCG，但要显著提高其对成人的保护效果尚有难度；新疫苗用于新生儿的临床研究因存在伦理问题而可能无法开展；针对潜伏结核感染人群的免疫预防是控制结核病的重要手段，以现用BCG为基础的新疫苗可能无法应用于此类人群。因此，新一代主流抗结核分枝杆菌疫苗将不会是建立在现用BCG基础之上的疫苗。
为探讨脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种经Toll样受体2(Toll-like receptor 2，TLR2)介导的c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)和细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)诱导THP-1巨噬细胞内肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)和白细胞介素8(interleukin 8，IL-8)表达的相关分子机制，本研究将脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种感染THP-1巨噬细胞，细菌与巨噬细胞最佳感染之比为感染复数(multiplicity of infection，MOI)＝3，用荧光定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)检测THP-1巨噬细胞感染两细菌亚种6 h后的胞内TNF-α和IL-8 mRNA水平，以及分别阻断TLR2、JNK 和ERK信号蛋白后TNF-α和IL-8 mRNA水平的变化。结果显示，脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种作用于THP-1巨噬细胞6 h后，均可诱导细胞内TNF-α和IL-8 mRNA水平显著上调，差异有统计学意义(P＜0.05)；分别阻断TLR2、JNK和ERK信号蛋白，脓肿亚种感染THP-1巨噬细胞后胞内TNF-α和IL-8 mRNA上调水平出现明显抑制，差异有统计学意义(P＜0.05)；分别阻断TLR2和JNK信号蛋白，马赛亚种感染THP-1巨噬细胞后胞内TNF-α和IL-8 mRNA上调水平均出现明显抑制，差异有统计学意义(P＜0.05)；而阻断ERK信号蛋白后，马赛亚种组仅见IL-8 mRNA水平明显抑制，差异有统计学意义(P＜0.05)，而TNF-α mRNA水平未见明显变化，差异无统计学意义(P＞0.05)。本研究提示，脓肿分枝杆菌脓肿亚种和马赛亚种均可作用于TLR2，诱导THP-1细胞内TNF-α和IL-8 mRNA水平上调，脓肿亚种可经JNK和ERK信号蛋白诱导TNF-α mRNA上调，马赛亚种可经JNK信号蛋白诱导TNF-α mRNA上调；脓肿亚种和马赛亚种诱导IL-8 mRNA上调可能与JNK和ERK信号蛋白相关。
分析深圳市南山区人民医院粪肠球菌感染患者的临床资料，探讨引起感染的危险因素，为防治耐利奈唑胺粪肠球菌感染提供临床参考。选取2010年1月—2015年9月在深圳市南山区人民医院住院的165例粪肠球菌感染患者，根据药敏结果分为利奈唑胺敏感组(103例)和利奈唑胺中介/耐药组(62例)。165例粪肠球菌主要来源于中段尿培养，占53.94%，其次为伤口分泌物培养(21.82%)、血培养(6.06%)；科室分布以泌尿外科和肝胆外科为主，分别占35.76%和9.70%。单因素分析显示，碳青霉烯类抗生素暴露、留置尿管与感染相关。Logistic回归分析进一步明确碳青霉烯类抗生素暴露、留置尿管为耐利奈唑胺粪肠球菌感染的危险因素，提示应严格掌握碳青霉烯类抗生素的适应证，加强医院内感染的控制管理。
在单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1，HSV-1)小鼠感染及其相关研究中，临床病理和免疫学指标对其分析具有重要技术意义。本研究观察了HSV-1在不同条件下感染BALB/c小鼠后的多个免疫学指标，包括外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)群体中树突细胞比例及功能、血清中和抗体水平、PBMC中HSV-1抗原特异性T细胞水平，以及潜伏感染期小鼠神经组织中CD8＋ T细胞浸润情况。结果显示，HSV-1毒株Mckrae、17＋以角膜及滴鼻途径感染3周龄及6周龄BALB/c小鼠后，小鼠PBMC中树突细胞数量增加，并显示出刺激病毒抗原特异性T细胞增殖的能力。病毒感染后35 d，小鼠PBMC中未检测到白细胞介素4(interleukin 4，IL-4)＋抗原特异性T细胞，但能检测到低水平的γ干扰素(interferon γ，IFN-γ)＋抗原特异性T细胞；小鼠血清中未检测到或仅能检测到低水平的中和抗体。HSV-1以皮下及足垫注射途径感染BALB/c小鼠90 d后，足垫感染途径较皮下感染诱导出更高水平的血清中和抗体，PBMC中可检测到IL-4＋及IFN-γ＋抗原特异性T细胞，但不同毒株及小鼠周龄之间出现T细胞反应程度差异。组织病理学结果表明，各组小鼠三叉神经组织中均有CD8＋ T细胞浸润。这些结果提示，不同HSV-1毒株以不同途径感染不同周龄BALB/c小鼠后，均可刺激树突细胞成熟及呈递病毒抗原，但血清中和抗体及PBMC中病毒抗原特异性T细胞水平在不同毒株、感染途径及小鼠周龄之间有差异。
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)共价闭合环状DNA(covalently closed circular DNA，cccDNA)是病毒慢性感染的分子基础。本课题组前期研究通过Cre/loxP介导的位点特异性DNA重组策略，在细胞核内由前体质粒诱导重组cccDNA(rcccDNAloxP)产生，首次建立了HBV cccDNA的体外培养细胞和小鼠实验模型。本研究基于大肠埃希菌ZYCY10P3S2T PhiC31重组酶诱导表达系统，建立了一种体外诱导HBV rcccDNA(rcccDNAattR)微环产生和纯化的策略。纯化的rcccDNAattR微环具有超螺旋结构，细胞培养实验证实其能支持功能性的HBV复制和抗原表达。与普通的线性HBV复制子编码质粒相比，rcccDNAattR尾静脉高压注射小鼠模型能诱导显著延长的病毒抗原血症。因此，本研究在原核表达系统和实验小鼠水平提供了一种更为简化的HBV cccDNA实验模型系统，并再次显示rcccDNA具有显著的稳定性，能作为一种基本策略在小鼠模型中诱导病毒持续感染。
牛分枝杆菌减毒活疫苗——卡介苗(bacillus Calmette-Guérin，BCG)对预防严重的儿童结核病有效，但其免疫保护效率随儿童年龄增长而降低。BCG不能提供终身免疫保护可能与其诱导的记忆性T细胞主要是寿命较短的效应记忆性T细胞有关。新型结核分枝杆菌蛋白亚单位疫苗将有效的抗原有机组合起来，在适宜的疫苗佐剂辅助下诱导Th1型免疫应答。动物实验表明，增加抗原谱可有效提高亚单位疫苗的保护效率。更重要的是，亚单位疫苗在体内持续时间较短，可诱导寿命较长的中央记忆性T细胞，提供比BCG更持久的免疫保护力。记忆性T细胞的分化受抗原特性与剂量、细胞因子、转录因子及雷帕霉素等的调控。对亚单位疫苗及其诱导的免疫记忆进行研究将对新型结核分枝杆菌疫苗的设计与评价产生积极影响。
中性粒细胞是抵御病原体入侵机体的第一道防线，通过趋化和吞噬作用使病原体失活，从而进行免疫防御，杀灭病原体。研究证实，中性粒细胞通过吞噬病原体、分泌抗微生物蛋白颗粒来杀灭病原微生物。2004年Brinkmann发现了一种中性粒细胞新型抗感染机制，即中性粒细胞经病原体活化刺激后释放中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap，NET)至细胞外。NET是由双链DNA染色质和镶嵌在染色质上的抗菌蛋白构成的纤维网格状结构，通过网罗、捕获而杀灭病原体。诸多研究表明，NET在炎症相关疾病中起重要作用，其生成和降解会影响急慢性炎性疾病的病理过程。本文主要从NET的特征、产生机制、抗菌作用及其在炎性相关疾病中的作用等方面着手，概述其最新研究进展，为炎性疾病的治疗及其药物开发提供新的思路和方向。
成簇的规律间隔的短回文重复序列及其相关蛋白〔clustered regularly interspaced short palindromic repeat(CRISPR)/ CRISPR-associated protein, CRISPR/Cas〕是原核生物在进化过程中形成的获得性免疫系统，能抵抗噬菌体、质粒及可移动遗传因子等外源性DNA或RNA的入侵。目前，在多种葡萄球菌基因组中均发现CRISPR序列存在，其间隔序列通常与葡萄球菌的噬菌体或接合性质粒具有同源性，可能对葡萄球菌的毒力、耐药性传递和生物膜形成等生理学特性有影响。本文在简单介绍细菌CRISPR/Cas系统的基础上，对葡萄球菌CRISPR/Cas系统的构成、防御机制等进行综述。
