疫苗的出现极大降低了感染性疾病的发病率和死亡率,显著保障了全球公共健康。本文系统回顾了疫苗的发展史,分析归纳了各类型疫苗的优缺点,并介绍了本实验室构建的一类具有广谱保护性的新型疫苗——精准设计疫苗。精准设计疫苗是一类应用高通量技术和反向遗传学技术,定向筛选病原体全基因组内特异位点、区域,进而精准设计的重组疫苗。基于个体基因、环境、生活方式等特征的精准医学引领了新一轮的医疗变革,而这种基于病原体或异常细胞的特定基因、蛋白、通路的精准设计疫苗则为疫苗的研发提供了全新的技术和思路,将推动疫苗学进入新时代。
本研究针对10种对人类健康威胁较大的烈性病毒建立反转录-环介导等温扩增法(reverse transcription-loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP),筛选出10种烈性病毒高特异性引物,并分别对这10种病毒进行特异检测。结果显示,其安全、便捷、快速,且高通量。在自主研发的RT-LAMP体系中,只需加入模板,结合配套仪器,扩增耗时不超过45 min,检测灵敏度为1~100拷贝/反应(25 μL)。检测30份人血清样品,筛查出1份裂谷热病毒阳性。该方法操作简单,可防止污染,成本低,易携带,方便于低配实验室或现场进行实时高通量检测。结果提示,针对10种烈性病毒的RT-LAMP方法可对口岸等人员流动性大的地区疑似患者进行快速筛查,展现出良好的应用前景。
Epstein-Barr病毒(Epstein-Barr virus,EBV)是可导致人类感染的淋巴滤泡病毒,感染非常普遍。本研究通过对2013年1月—2016年12月于复旦大学附属华东医院就诊并确诊为淋巴瘤且伴有EBV感染的49例患者的临床资料进行回顾性分析,探讨EBV相关淋巴瘤患者的临床特点及生存情况。结果显示,49例EBV相关淋巴瘤患者中,18例为B细胞淋巴瘤,31例为T/NK细胞淋巴瘤。EBV相关B细胞淋巴瘤与T/NK细胞淋巴瘤患者之间白细胞、血小板、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、铁蛋白、纤维蛋白原、红细胞沉降率、C反应蛋白的差异有统计学意义(P<0.05)。中位随访5.0个月,49例患者的1个月、6个月、1年、3年生存率分别为 84.4%、59.8%、53.2%、40.3%。结果表明,与EBV相关B细胞淋巴瘤患者相比,EBV相关T/NK细胞淋巴瘤患者的肝功能损伤严重,更易合并噬血细胞综合征,生存期更短,但生存期差异无统计学意义。
为了解肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)合并Epstein-Barr 病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染患儿的血清因子水平和免疫功能,选取2016年9月—2017年3月于上海交通大学附属第六人民医院儿科住院的肺炎支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae pneumonia,MPP)合并EBV感染患儿(A组)、单纯MPP患儿(B组)和小儿骨科择期行六指切除手术的患儿(C组),采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测3组患儿血清白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、IL-4、γ干扰素(interferon γ,IFN-γ)、IL-10水平。结果显示,A和B组IL-6、IL-4、FIN-γ、IL-10水平高于C组(P<0.05),A组IL-6、IL-10水平高于B组(P<0.05),且A组中重症肺炎患儿血清IL-6、IL-10、IL-4水平较非重症肺炎患儿高(P<0.05)。结果提示,MPP合并EBV感染患儿体内存在细胞免疫紊乱,MPP合并EBV感染后可通过诱导机体分泌 IL-6、IL-4、IFN-γ、IL-10而造成组织损伤。因此, IL-6、IL-4、IFN-γ、IL-10的检测对MPP合并EBV感染的诊断及评估病情具有重要意义。
持留菌是细菌群体中的一小部分细菌,可耐受致死浓度抗生素的处理,是引起慢性感染的重要原因。金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S. aureus)作为常见致病菌,有重要临床意义。分别敲除sdhA和sdhB后,金黄色葡萄球菌持留菌形成水平下降,但sdhCAB操纵子对持留菌形成的作用及机制尚不明确。本研究敲除sdh操纵子,通过酸压力、氧化压力、热压力及抗生素压力实验检测敲除株的持留菌水平,转录组测序检测敲除株的代谢通路变化,高通量微生物细胞表型检测评估敲除株的代谢水平变化。结果显示,敲除sdhCAB或sdhAB后,金黄色葡萄球菌对酸压力、氧化压力的耐受能力均下降;而在抗生素压力、热压力条件下,分别仅sdhCAB敲除株、sdhAB敲除株耐受能力下降。转录组测序发现,sdhCAB敲除后三羧酸循环、甲烷代谢通路及聚合酶Ⅳ等基因表达上调,耐药相关基因、氨基酸代谢基因、糖类代谢基因、卟啉代谢基因及一些转运体基因等表达下调,提示这些通路的基因参与sdhCAB影响持留菌形成的过程。此外,高通量微生物细胞表型检测发现,敲除sdhCAB可降低金黄色葡萄球菌对琥珀酸、柠檬酸、糖原、L-天冬氨酸等64种碳源的代谢。结果提示,sdhCAB操纵子对金黄色葡萄球菌持留菌形成水平有重要影响。本研究初步阐明了sdhCAB操纵子影响持留菌形成的可能机制,为研究和治疗金黄色葡萄球菌慢性感染提供了新的思路。
光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)是利用特定波长的激发光照射生物靶标上的光敏剂,从而产生活性氧并有效杀伤多种耐药病原体的新型治疗方式,具有作用广、安全可控、不易耐受等优点。大量体外实验已证实了PDT疗效,但目前动物实验数据较少,且治疗参数不一,一定程度上影响了PDT在临床治疗中的广泛应用。本文综述近年来PDT用于体内抗感染治疗的动物模型构建、治疗方案设计等方面的研究进展,为未来PDT抗感染研究及临床应用提供参考。
由于抗菌药物的开发周期越来越长,远远赶不上细菌耐药的发展速度,临床鲍曼不动杆菌多重耐药与泛耐药现象日益严重。因此,人们越来越关注对抗菌药物以外的抗菌物质的开发,尤其是从生存条件方面来研究抑制耐药菌活性的方法,如金、银、铜等金属离子对鲍曼不动杆菌的作用。本文主要综述铁、锌等金属离子及其螯合物对鲍曼不动杆菌的抗菌作用。铁、锌等金属离子通过与一系列酶的协同作用,调控外排泵或影响生物膜形成及其黏附性等来抑制细菌生长。此外,一些非必需金属如金、银、钯等对鲍曼不动杆菌也具有很强的毒性,有良好的抗菌和降低耐药率的效果,可作为医疗留置器械的抗菌涂层等来预防感染。
在讲授医学微生物学知识的同时,对医学生进行医学人文教育,将有助于培养德才兼备的医学人才。本文提出了在医学微生物学课程中可融入人文教育的几项知识点,希望对该课程的医学人文教育有所启示。
医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室 上海市公共卫生临床中心 复旦大学 万方数据 中国知网 维普资讯
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