微生物与感染
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微生物与感染
2018年 13卷 4期
刊出日期 2018-08-25

特约专稿
论著
病例分析
综述
   
特约专稿
193 应天雷,闻玉梅
抗体治疗的重生

近年来,治疗性单克隆抗体已成为基础和临床医学研究者及企业关注的热点。目前,针对免疫检查点的治疗性抗体用于肿瘤治疗已显示出较好疗效。在微生物耐药性日益增多、全球突发传染病威胁依然存在及持续性微生物感染难以治愈的当下,抗微生物领域中的抗体治疗正在积极研发中。本文综述了抗体治疗在抗微生物感染领域中的进展,并展望了其应用前景。

2018 Vol. 13 (4): 193-197 [摘要] ( 171 ) [HTML ( )] [PDF 412KB] ( 611 )
论著
198 白金金,龙健儿
肠道病毒71型感染诱导细胞程序性死亡形态学及分子生物学特征的初步研究

肠道病毒 71型(enterovirus type 71,EV71)感染常可引起婴幼儿手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD),还可引起中枢神经系统并发症等重症,甚至死亡。研究认为,EV71诱发重症的原因主要与病毒感染诱导细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)及诱导细胞产生大量炎症因子有关。病毒感染可通过激活不同的信号通路触发细胞程序性死亡,主要包括含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase)依赖的细胞凋亡、细胞焦亡,以及非caspase依赖的细胞坏死性凋亡。本研究旨在探讨EV71感染诱导细胞程序性死亡的形态学和分子生物学特征,利用显微镜和免疫荧光技术检测EV71感染后细胞形态变化,JC-1染色检测感染后细胞线粒体膜电位变化,流式细胞术及Annexin V-FITC/PI双染法、乳酸脱氢酶释放量法检测感染细胞的细胞膜损伤程度,结合蛋白免疫印迹法检测病毒感染后细胞中多聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose) polymerase,PARP]、caspase-9、caspase-3等凋亡因子,以及细胞焦亡关键效应蛋白Gasdermin D、坏死性凋亡效应蛋白MLKL的磷酸化情况。结果显示,EV71感染后细胞主要呈现凋亡特征,并伴随少量细胞坏死。与细胞凋亡相关的PARP被剪切,caspase-9和caspase-3等相关因子被激活。经泛caspase抑制剂处理后,细胞程序性死亡被抑制,但仍有部分细胞坏死。结果提示,EV71感染以细胞凋亡为主,也可能存在非caspase依赖的细胞程序性死亡。

2018 Vol. 13 (4): 198-206 [摘要] ( 173 ) [HTML ( )] [PDF 14211KB] ( 332 )
207 周凤竹,胡亚文,葛文雪,张雪莲
应用CRISPRi技术敲低耻垢分枝杆菌异柠檬酸脱氢酶基因

成簇的规律间隔的短回文重复序列干扰(clustered regularly interspaced short palindromic repeat interference,CRISPRi)是一种新型转录抑制技术,该系统包含RNA介导的DNA内切酶dCas9和针对目的基因的特异性单向导RNA(single guide RNA,sgRNA),通过形成DNA识别复合物特异性识别相应DNA序列以抑制目的基因的转录。异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,ICD)是三羧酸循环中的关键代谢酶,在分枝杆菌的碳代谢过程中发挥重要作用。本研究利用CRISPRi高效抑制分枝杆菌特定基因表达的方法构建耻垢分枝杆菌icd敲低(icd knockdown,ICD-KD)株。定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)和蛋白免疫印迹检测结果显示,耻垢分枝杆菌中icd转录水平与ICD蛋白表达水平显著下降,表明采用CRISPRi技术成功构建了耻垢分枝杆菌ICD-KD株。进一步研究ICD-KD株的生长情况,测定其在固体培养基点板及液体培养基中的生长曲线,结果均显示ICD-KD株生长速率明显减慢,同时菌体内ICD酶活显著降低,提示ICD对分枝杆菌的生长存活起重要作用。本研究使用CRISPRi技术快速构建了分枝杆菌必需基因的敲低菌株,为后续研究分枝杆菌ICD在碳源代谢通路中的功能和碳通量流向调控机制提供了重要基础。

2018 Vol. 13 (4): 207-212 [摘要] ( 134 ) [HTML ( )] [PDF 2533KB] ( 406 )
213 卢斌1,王思1,杨荣礼2,陈梦楠2,李平静2,李雷2,卢海龙2,杨荣胜3,邓丽华3
老年大肠埃希菌血流感染患者的临床分析

为探讨老年大肠埃希菌血流感染患者的临床特点及药敏结果,回顾性分析徐州医科大学附属医院2013年1月—2016年12月340例大肠埃希菌血流感染老年患者的临床资料及药敏结果,采用SPSS软件进行分析。结果显示,患者均合并基础疾病(恶性肿瘤、高血压病、糖尿病、肺部感染等);感染途径主要为消化道(38.5%)、呼吸道(36.8%)和泌尿道(22.6%);检出产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamase,ESBL)大肠埃希菌96例(28.2%);ESBL阳性菌对氨苄西林、复方磺胺甲恶唑、环丙沙星、哌拉西林、第3代头孢、左氧氟沙星的耐药率均高;所有菌株均对碳青霉烯类敏感。结果提示,该院老年大肠埃希菌血流感染患者均合并基础疾病,常见感染途径是消化道、呼吸道和泌尿道,ESBL阳性大肠埃希菌除对碳青霉烯类抗菌药物敏感外,对多种抗菌药物耐药。

2018 Vol. 13 (4): 213-219 [摘要] ( 156 ) [HTML ( )] [PDF 735KB] ( 417 )
220 罗斌1,3,钱凯1,3,徐万祥2,唐海平2,季朝能1,3,谢毅1,3,顾少华1,3
4种禽流感病毒M2e多肽的串联表达和小鼠口服免疫效果

为研制广谱性禽流感口服疫苗,将4种禽流感病毒特异的基质蛋白2胞外区(matrix protein 2 ectodomain,M2e)多肽与黏膜免疫佐剂CTA1-DD串联,原核表达并纯化CTA1DD-AVI4M2e融合蛋白。以200 μg融合蛋白CTA1DD-AVI4M2e口服免疫BALB/c小鼠,结果显示实验组肠液IgA抗体效价和血清IgG抗体效价比对照组显著升高,血清中特异性IgG抗体效价达约360倍。分割的3段肠样中:第1段浸出液IgA抗体效价约为360倍,第2段约为120倍,第3段约为 9 720 倍。结果表明,本研究制备的CTA1DD-AVI4M2e具有显著口服免疫效果,为后续研究提供了基础。

2018 Vol. 13 (4): 220-226 [摘要] ( 109 ) [HTML ( )] [PDF 2823KB] ( 504 )
病例分析
227 邱菊,李娟,高源,王开金
支气管结石合并肺部盖尔森基兴奴卡菌感染1例

本文旨在通过对1例支气管结石伴盖尔森基兴奴卡菌肺炎患者的诊治过程进行回顾,并对相关文献进行复习,以提高临床医师对此类疾病的认识。该患者为结石性体质,胸部计算机断层扫描(computed tomography,CT)提示支气管内高密度影;无痛纤维支气管镜下确诊支气管内膜结石,给予患者支气管镜下碎石、取石,并送病理科行切片活检,同时行痰涂片、痰培养寻找病原体。结果成功在肺泡灌洗液中培养出盖尔森基兴奴卡菌,针对盖尔森基兴奴卡菌感染给予敏感药物治疗3个月后痊愈。支气管结石伴盖尔森基兴奴卡菌肺炎极其罕见,尤其局限于呼吸系统感染者更为少见。此类疾病需考虑支气管内膜结石所致支气管扩张等结构性疾病存在,导致局部抵抗力低下,从而引起条件致病菌盖尔森基兴奴卡菌感染。针对此类患者,建议及早行纤维支气管镜检查并完善灌洗液涂片、抗酸染色、灌洗液培养以获得病原学证据,为治疗赢得时间。控制盖尔森基兴奴卡菌感染后,需及早行纤维支气管镜下碎石等治疗,以纠正局部结构改变,减少再次感染机会。

2018 Vol. 13 (4): 227-232 [摘要] ( 153 ) [HTML ( )] [PDF 15774KB] ( 335 )
综述
233 张逸,王晓雯,李若瑜
CARD9突变在真菌感染性疾病中的研究进展

胱天蛋白酶募集域蛋白 9(caspase recruitment domain-containg protein 9,CARD9)属于 CARD 家族中的一员,存在于脾、肝、胎盘、肺、脑等人体多种组织中,是高度表达于中性粒细胞、巨噬细胞及树突细胞等髓系细胞中的一个重要衔接蛋白。CARD9可与Bcl-10、黏膜相关淋巴组织淋巴瘤转运蛋白1(mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma translocation protein 1,MALT-1)结合并形成CARD9-Bcl-10-MALT-1(CBM)复合体,作为C型凝集素受体(C-type lectin receptor,CLR)等通路的重要媒介,激活核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)等炎症信号通路,在抗真菌免疫中发挥重要作用。迄今为止,全世界已报道14个国家共56例患者发生18种CARD9突变的报道,真菌类型涉及念珠菌、皮肤癣菌、暗色真菌及曲霉等。本文针对CARD9突变在不同真菌感染性疾病中的研究进展进行综述。

2018 Vol. 13 (4): 233-244 [摘要] ( 173 ) [HTML ( )] [PDF 5660KB] ( 479 )
245 郭炽鹏,陆春,朱国兴
解脲脲原体耐药性研究进展

解脲脲原体是条件致病菌。目前对其耐药性的研究主要包括对喹诺酮类、大环内酯类和四环素类3种抗菌药物相关耐药突变位点的检测,以及生物膜对病原体相关药物敏感性的影响,研究方法和检验手段仍较为传统、局限,研究方案也仅停留在对前人实验的重复。近年来,有学者将多位点序列分型技术用于解脲脲原体耐药序列类型的研究。在完善耐药机制研究的基础上,如何实现对耐药株的快速鉴定,从而指导抗菌药物的合理选择等仍需进一步研究。

2018 Vol. 13 (4): 245-249 [摘要] ( 158 ) [HTML ( )] [PDF 435KB] ( 401 )
250 王建斌,李琦涵
朗格汉斯细胞与病毒感染

朗格汉斯细胞位于黏膜状组织和皮肤分层鳞状上皮,是高度专职的抗原呈递细胞家族成员,也是表皮中唯一的树突细胞。其作为一种皮肤免疫细胞,在摄取、加工处理和呈递抗原及诱导 T 细胞反应等方面发挥着巨大作用。机体皮肤或黏膜在遭遇不同病原微生物入侵时,朗格汉斯细胞与病原体的相互作用及引起后续免疫反应的机制存在差异。本文就朗格汉斯细胞的生物学功能及其在一些病毒感染中的作用进行综述。

2018 Vol. 13 (4): 250-256 [摘要] ( 141 ) [HTML ( )] [PDF 548KB] ( 443 )
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