2023年, 第18卷, 第6期　
刊出日期：2023-12-25

  

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论著
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  急慢性感染中B淋巴细胞应答规律比较研究的病毒工具构建

  金程萌，白露，李雨檬，王倩瑜，李建华

  微生物与感染. 2023, 18(6): 321-330. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.001

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  在急性或慢性等不同感染情况下B淋巴细胞应答规律各异。本研究旨在构建重组Armstrong株和重组Clone13株淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic choriomeningitis virus, LCMV)，以诱导针对WE株糖蛋白(glycoprotein, GP)特异的B细胞受体(B cell receptor, BCR)转基因细胞KL25HL B细胞应答，从而为比较急慢性感染过程中宿主B细胞的免疫应答差异建立实验模型。首先，通过共转染细胞，使之转录LCMV基因组片段并表达病毒蛋白，成功拯救出重组LCMV-Armstrong(recombinant LCMV-Armstrong，rARM)和重组LCMV-Clone13(recombinant LCMV-Clone13，rCL13)。测序分析表明，这2种重组病毒的GP序列被成功替换为LCMV-WE株的GP序列，并证实它们在感染细胞后具备蚀斑形成能力。随后，本研究使用rARM及rCL13感染野生型C56BL/6J小鼠。结果表明，这2种重组病毒保留了野生LCMV-Armstrong(wild type LCMV-Armstrong, wtARM)或野生LCMV-Clone13(wild type LCMV-Clone13, wtCL13)株等所具备的急性或慢性感染特性。具体而言，在rARM和rCL13建立感染后，rARM将在1周内被宿主免疫系统快速清除，而rCL13可在宿主体内持续存在超过2个月。最后，用不同LCMV感染过继转移了KL25HL B细胞的野生型小鼠。结果显示，与wtARM或wtCL13相比，感染rARM或rCL13后可明显诱导特异性B细胞发生激活、增殖等免疫应答反应。本研究构建的rARM及rCL13在感染小鼠并过继KL25HL B细胞后，可作为急慢性感染中B淋巴细胞应答规律比较研究的有力工具，对于深入理解体液免疫应答机制具有重要意义。
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  耐药金黄色葡萄球菌医院感染的临床特征及危险因素分析

  尚伟1，蔡丽娜2，代稳1，孙振威1，陈北方1

  微生物与感染. 2023, 18(6): 331-337. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.002

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  本研究旨在分析某医院两年来引起医院感染的耐药金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S. aureus)体外药敏试验结果、耐药类型及感染危险因素，探讨其在临床控制耐药菌的发生、医院感染和合理应用抗菌药物方面的参考价值。分析2020—2021年度从本院医院感染患者体内分离的耐药金黄色葡萄球菌的药敏试验结果，并采用单因素和Logistic回归分析探讨耐药金黄色葡萄球菌感染的独立危险因素。结果显示，多重耐药的金黄色葡萄球菌菌株占49.7%(69/139)，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant Staphylococcus aureus，MRSA)菌株占41.0%(57/139)，产β-内酰胺酶(BETA-LACT)菌株占72.7%(101/139)，克林霉素诱导型(INDUC-CLI)耐药菌株占15.1%(21/139)。金黄色葡萄球菌主要分离自呼吸道和伤口感染部位(36.0%和48.9%)，其对多种抗菌药物的耐药率较高，对万古霉素和替加环素敏感率达100%，对利奈唑胺和氯霉素敏感率分别为99.28%和93.85%。回归分析显示，侵入性操作的OR值为3.184，P<0.05。本研究证实金黄色葡萄球菌主要从伤口部位样本分离，临床多重耐药细菌占比较高，多数为耐甲氧西林和产β-内酰胺酶菌株，临床常用抗菌药物的耐药率较高；侵入性操作是耐药S. aureus感染的独立危险因素。
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  院内三色分区管理模式在SARS-CoV-2核酸采集中的应用效果评价

  邵小平1，韦小梅1，蒋思琼2，胡三莲3

  微生物与感染. 2023, 18(6): 338-345. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.003

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  本研究旨在研究疫情期间三色分区管理模式在院内严重急性呼吸系统综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2，以下简称新冠病毒)核酸采集管理上的应用效果。选取2022年4月1—15日于我院进行新冠病毒核酸采样的患者和工作人员作为对照组，采用原核酸采样检测模式；选取2022年4月16日—30日我院进行新冠病毒核酸采样的患者和工作人员作为观察组，采用三色分区管理模式，比较应用效果。结果显示，相较于对照组，观察组红区核酸采样—运送—检测全程时间 (均P<0.05)、黄区核酸采样(P＝0.024)和检测时间(P<0.001)、核酸异常患者追查时间(P<0.001)均显著缩短；核酸样本漏液 (P＝0.018)、内参过少(P＝0.012)、信息错误(P＝0.014)等质量不合格的情况(P＝0.001)显著减少；患者(P<0.001)及工作人员(P<0.001)的满意度均显著提升。本研究证实三色分区管理模式可以有效缩短疫情高传播风险人群核酸标本采样—运送—检测各环节以及核酸异常患者追查的耗时，提高工作效率，改善核酸标本质量，提升患者和工作人员的满意度。
病例分析
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  肺腺癌患者血流感染哈特草螺菌的相关研究

  王群，张丽，吴卫星，谢争华

  微生物与感染. 2023, 18(6): 346-352. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.004

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  本研究旨在分析肿瘤患者血流感染哈特草螺菌的鉴定及药敏特点，同时对相关菌株感染病例进行回顾分析，为临床治疗提供指导依据。将1例肺腺癌患者放疗后留取的血培养阳性标本进行涂片、染色、镜检，同时采用VITEK MS全自动微生物质谱检测系统、VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统和分子测序技术对该分离株进行鉴定分析，并参照其他非发酵革兰氏阴性杆菌药敏实验标准进行药敏试验。结果显示，该分离株为革兰氏阴性杆菌，在血平板上呈乳白色、胶状、凸起、无溶血菌落。VITEK MS质谱仪和分子测序技术将此菌株均鉴定为哈特草螺菌(Herbaspirillum huttiense，H. huttiense)，VITEK 2 Compact将其鉴定为洋葱伯克霍尔德菌。药敏试验结果显示，该菌对氨曲南中介，对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦钠、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦和左氧氟沙星等抗菌药物均敏感。本研究报告了哈特草螺菌的生物学特征和病例的诊疗过程，强调了多种诊断技术联合应用在罕见菌鉴定中的重要性。
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  长奈瑟菌致胸腔感染1例报道

  王群，张晓煜

  微生物与感染. 2023, 18(6): 353-357. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.005

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  本文报道了国内罕见的由长奈瑟菌引起的胸腔感染病例。分离菌株的鉴定分析采用MALDI TOF Vitek MS系统、VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统和分子测序技术；常规药敏试验采用K-B法和E-Test法，并参照美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)对脑膜炎奈瑟菌的要求进行折点判读。同时分析长奈瑟菌的生物学特征及感染病例的诊疗过程，从而提高临床微生物人员对罕见病原菌的重视，并为临床诊疗提供实验室依据。
综述
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  NLRP 6在抗细菌感染免疫中的作用研究进展

  曹宇1, 2，龚亚婷1，吴淑燕1，黄瑞1

  微生物与感染. 2023, 18(6): 358-363. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.006

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  含热蛋白结构域的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白 6(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain containing 6，NLRP 6)是宿主固有免疫重要的胞内模式识别受体之一，参与机体感染、炎症、肿瘤和代谢性疾病的调节。它可通过感知细菌、病毒、真菌和寄生虫等病原生物及其产物，如革兰氏阳性菌脂磷壁酸(lipoteichoic acid，LTA)和病毒双链RNA，调节机体抗感染免疫效应，减弱或增强宿主的抵抗力，从而影响感染的转归。本文就NLRP 6的结构与功能及其在抗细菌感染免疫中的作用研究作综述。
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  SFTSV感染引起B淋巴细胞免疫功能改变的研究进展

  李雪1，2，*，许文2，*，陈威巍2

  微生物与感染. 2023, 18(6): 364-369. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.007

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  发热伴血小板减少综合征病毒(sever fever with thrombocytopenia syndrome virus，SFTSV)是近年发现的新病毒。该病毒感染引起的发热伴血小板减少综合征(sever fever with thrombocytopenia syndrome，SFTS)以高热、血小板和白细胞减少、多脏器功能损伤为主要临床特征，死亡率5%～30%。目前尚无验证有效的抗病毒药物和疫苗。SFTSV感染可引起患者免疫功能紊乱，B淋巴细胞是该病毒感染的重要靶细胞之一，但SFTSV感染对B淋巴细胞功能的影响尚不完全清楚。本文对SFTSV感染引起的B淋巴细胞免疫功能异常及其机制研究进行综述，以期促进SFTSV感染的免疫病理机制研究，为深入认识SFTSV感染对B淋巴细胞的影响，开发相关诊疗技术提供基础。
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  病毒性脑(膜)炎精确诊断的研究进展

  朱坤，林可，张昊澄，艾静文，张文宏

  微生物与感染. 2023, 18(6): 370-377. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.008

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  病毒性脑(膜)炎是一种严重威胁公共卫生的中枢神经系统炎症性疾病。尽管病史、症状体征、常规检测、影像学，以及分子诊断技术的不断改进等对病毒性脑(膜)炎诊断具有至关重要的作用，但其仍然受到技术、检测试剂、样本类型、检测时间窗口等因素的限制，且须根据不同的临床特征选择合适的诊断技术。仍有40%～60%的患者难以明确病因，进行及时、准确的诊断是开展针对性适当治疗的基石。60%～80%的病毒性脑(膜)炎患者首次就诊发生在基层医疗机构，而基层医院因技术条件所限，确诊率低于20%，因此制定规范化的病因学诊断路径，实行分级诊断策略尤为必要。在基层医院条件有限的情况下，通过详细询问病史、全面体格检查及基本实验室检查初步确定诊断方向；根据疑似病因，通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)等常规分子生物学技术进行病原体初筛；在PCR结果阴性或不可行时，考虑应用如宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing，mNGS)的非靶向广覆盖技术；建立多学科团队诊疗模式及临床诊疗网络以提高确诊率，改善患者的临床结局。随着检测技术的进步和人工智能的应用，病毒性脑(膜)炎诊断将更准确。
医学论坛
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  医学微生物学课程线上教学和考试模式下的试卷分析与教学思考

  邓国英1，孙文长1，杨淑凤1，李星云1，戴晓冬2，刘欣1

  微生物与感染. 2023, 18(6): 378-384. https://doi.org/10.3969/j.issn.1673-6184.2023.06.009

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  本研究旨在评估大连医科大学医学微生物学课程线上教学效果，及时发现和总结线上教学中存在的问题，为教学课程改革提供依据。使用大连医科大学网络题库与考试评价系统对2021年参加医学微生物学课程线上学习和考试的641名学生的试卷进行分析，分析内容包括试卷各章节的正确率、难度系数、信度和区分度。结果显示，本次考试成绩呈正态分布，各章节正确率为70%～90%，考试平均分72.28，及格率85%，优秀率4%。试卷总体质量良好，难度略偏易，难度系数0.72。信度和区分度好，区分度0.29，信度为0.9。2021年线上教学与2019年线下教学的学生期末试卷成绩相比无显著性差异(P＞0.05)。本研究证实本次线上考试试卷总体质量良好，能够客观体现教学质量和学生学业水平，线上教学效果基本满意。本研究还比较了试卷中各题型的难度系数和区分度，为今后制定科学合理的线上考核试卷提供依据和参考。