微生物与感染
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微生物与感染
2023年 18卷 5期
刊出日期 2023-10-25
论著
病例分析
综述
论著
257
白金金 方钟 庞智
HBV 感染对肝癌细胞脂类代谢相关蛋白表达的影响
乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）是非细胞病变的病毒，其持续感染造成的肝脏损伤逐步引起肝脏炎症，进而导致肝纤维化，肝硬化，最终引起了80%的肝细胞肝癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）。肝脏是机体代谢的重要器官，癌基因的异常活化以及抑癌基因的抑制失活会造成细胞代谢水平以及代谢方式的改变，称为细胞代谢重编程（metabolism reprogramming），代谢重编程是肝脏炎症到癌症转化的关键步骤。本研究通过反转录酶定量聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR）、酶联免疫吸附实验（ELISA）、多重荧光免疫组化等方法检测HBV阳性细胞（或组织）与对照细胞（或组织）中脂质代谢关键基因的表达，在此基础上分析其功能和脂代谢的关系。结果显示，在稳定表达HBV的HepG2.2.15及HBsAg的Hep3B细胞中，脂代谢相关基因HMGCR、SREBP-2以及PSCK9的mRNA表达量显著上调，且在肝细胞癌患者的临床病理结果中相应蛋白表达水平也同步升高，提示HBV感染导致了相应代谢基因的高表达，且HBsAg是调控脂质代谢酶基因紊乱的关键蛋白。通过对365例大样本肝癌患者的病理资料分析，发现脂代谢相关基因在肝癌组织中的高表达有预后变差的趋势，提示脂质代谢的紊乱可能是影响肝癌患者总生存期的危险因素。
2023 Vol. 18 (5): 257-268 [
摘要
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269
马华杰 邬敏 张占卿 袁正宏 易志刚 张小楠
基于微滴数字PCR建立单细胞研究HBV的方法
肝组织内乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）的单细胞研究是十分重要的，但相关研究技术尚处于推进阶段，不能满足临床需要。基于微滴数字PCR，本研究建立了一套单细胞水平绝对定量HBV DNA和RNA的单细胞微滴数字PCR方法(single-cell digital droplet PCR, sc-ddPCR)。通过混合不同比例的HBV阳性和阴性细胞模拟HBV慢性感染状态下的肝脏，分析此方法检测HBV DNA的线性和检测下限。以cccDNA来源RNA（episome-derived RNA, eRNA）为例，进一步设计针对RNA的sc-ddPCR检测方案。利用不同来源转录本在结构上的差异，设计特异性针对eRNA的引物探针体系，在HBV肝癌细胞系中验证此引物和探针体系的特异度，并利用梯度稀释的HBV标准细胞株分析此方法检测eRNA的线性和检测下限。结果显示，本研究建立了基于ddPCR的DNA和RNA的单细胞水平检测方法，表现出良好的线性（HBV DNA：R2=0.9998；eRNA:R2=0.9425）,梯度稀释的HBV标准细胞株均能准确检测出阳性信号，具有高灵敏度（检测下限：HBV DNA=0.16%，eRNA=0.2%）。本研究建立的sc-ddPCR方法可针对DNA和RNA进行多重检测，为进一步肝组织内 HBV 病毒学活动的研究提供了良好的技术支撑，可以更深入地分析肝组织内HBV的病毒学特征，有利于 HBV 治疗策略的优化和研发，具有广阔的应用前景。
2023 Vol. 18 (5): 269-277 [
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278
张丹 孙桂芹
脑膜败血伊丽莎白菌致老年患者医院感染的危险因素、临床特征及耐药性分析
摘要：目的探讨老年患者脑膜败血伊丽莎白菌（EM）感染的危险因素，临床特征及耐药情况，为临床科学有效的治疗提供参考。方法 分析2018年1月—2023年1月绍兴市人民医院分离的27株60岁以上老年EM感染患者的菌株，采用VITEK-2全自动微生物鉴定药敏分析仪进行菌种鉴定和药敏实验，并统计该菌的感染临床特征和耐药性。结果EM主要感染住院时间长，住院天数≥28天的患者占（66.7%）；存在严重基础疾病，其中COPD患者占（25.9%），肺部感染占（18.5%），恶性肿瘤占（22.2%）；长期应用广谱抗菌药物及接受过有创操作的老年患者。标本类型以痰液标本为主占（87.8%），其次为尿液占（9.1%）；患者主要来自重症医学科（74.1%），其次是放疗科（7.4%）；EM对多种广谱抗菌药物表现为高度耐药，但对多西环素100%敏感，对头孢哌酮/他唑巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、复方新诺明、左氧氟沙星的耐药性均<30%。结论存在严重基础疾病并长时间住院、联合使用广谱抗菌药物以及接受多种侵入性诊疗是老年患者感染EM的危险因素，EM多重耐药现象严重，合理使用抗菌药，积极治疗原发病，尽量减少有创操作，降低住院时间，加强医疗环境管理，有利于EM的治疗和预防。
2023 Vol. 18 (5): 278-283 [
摘要
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病例分析
284
徐茂锁 申春梅 周聪 张慧
哈特草螺菌食源性感染致脓毒症1例
为探讨实验室常规鉴定手段对哈特草螺菌临床分离株的鉴定能力，分析案例患者血液中哈特草螺菌的感染来源，使用自动生化鉴定系统、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrixassisted laser ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS）、16S rRNA基因测序和RNA 聚合酶的β亚基（rpoB）基因测序对哈特草螺菌进行鉴定，并对患者多部位标本进行哈特草螺菌检测。结果显示，自动生化鉴定系统将哈特草螺菌错误识别为洋葱伯克霍尔德菌，MALDI-TOF MS和16S rRNA基因测序无法鉴别哈特草螺菌、aquaticum草螺菌或camelliae草螺菌，rpoB基因测序可以准确鉴定哈特草螺菌；除血液外，仅在患者粪便中检出少量哈特草螺菌，血液和粪便来源的哈特草螺菌肠杆菌基因间重复共有序列PCR（Enterobacterial repetitive intergenic consensus polymerase chain reaction，ERIC-PCR）结果显示两者DNA带型一致，MALDI-TOF MS MSP聚类分析显示两者位于同一节点，且Distance Level<50，其耐药表型亦相同，血液和粪便来源的哈特草螺菌高度同源。本研究展示了自动生化鉴定系统、MALDI-TOF MS、16S rRNA基因测序和rpoB基因测序对哈特草螺菌的鉴定水平，证实了哈特草螺菌可通过污染食物，经胃肠道感染造成直肠腺癌术后化疗患者发生脓毒症。
2023 Vol. 18 (5): 284-289 [
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综述
290
周飞 赵恒 樊雪雁 董晨明
基于肠道菌群产物浅谈脓毒症免疫紊乱
脓毒症已成为入住ICU患者的主要死亡原因之一，然而目前对于脓毒症尚无特效性治疗办法。在对脓毒症病理生理的研究中，发现免疫紊乱在脓毒症的发病及病情发展中起着重要作用。肠道菌群作为人体内最大的共生体，研究显示其可以通过多种方式影响宿主的免疫状态，但其确切机制尚无统一报道。基于肠道菌群在宿主免疫调节中的作用，本文从肠道菌群产物的角度综述了肠道菌群在脓毒症免疫调节中的机制，指出肠道菌群一方面调节宿主免疫系统的发育和功能；另一方面，脓毒症诱导的肠道菌群失调也将导致菌群产物的改变从而丧失对免疫系统的正常调节作用，这可能是促进脓毒症进一步发展的原因。而基于肠道菌群的生物疗法，或许有望成为脓毒症常规治疗外的重要补充。
2023 Vol. 18 (5): 290-296 [
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297
陈丽羽 耿焱
肠道噬菌体在粪菌移植技术中的研究进展
摘要：粪菌移植（Fecal microbiota transplantation，FMT）是一种创新的方法，通过将健康供体的粪便微生物群移植到疾病患者体内，达到重建肠道微生态平衡的目的，为治疗疾病提供帮助。在治疗复发性的顽固艰难梭菌感染的治疗中，疗效很好。近年来，其治疗潜力不仅仅局限于胃肠道疾病，也在其他与微生物相关的疾病中被不断挖掘。虽然肠道细菌组在胃肠道疾病的发病机制中起着重要作用，但是除了肠道细菌组，肠道噬菌体组也起了很大的作用。最近，肠道噬菌体对FMT治疗成功的影响才得到重视。本综述总结了肠道噬菌体和对FMT治疗各种疾病的影响最新文献，并讨论了并强调了噬菌体在FMT疗效中的作用以及安全性问题，以提高对肠道噬菌体在FMT中作用的理解及为更好的临床实践提供信息。
2023 Vol. 18 (5): 297-306 [
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郭华琦 王艳青
铁离子在淋球菌感染宿主中的作用
探讨铁离子在淋球菌感染宿主过程中的作用，为淋病防治提供思路。查阅知网、万方、维普、PubMed四大数据库，搜索铁离子在淋球菌感染宿主过程中的调节作用及与耐药的相关性。从淋球菌黏附、竞争铁离子、抵抗宿主杀伤、人群间传播等方面分析显示：淋球菌通过降低菌内铁含量，下调对宿主抗菌物质的敏感性；菌内铁含量较低时可通过上调铁摄取基因表达，分泌转铁蛋白/乳铁蛋白结合蛋白、铁载体、MpeR等物质，从宿主糖蛋白内抢夺铁离子，促进淋球菌在宿主细胞内存活和播散。由此可得铁离子在淋球菌基本生存需求、抵御杀伤、传播播散等方面都发挥重要作用，通过调节菌体内、外铁离子的浓度，可增强防病作用。
2023 Vol. 18 (5): 307-311 [
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章鹏程 张华
空气净化消毒技术现状及展望
随着人民生活水平的不断提高，仅仅创造具有适宜温湿度的舒适性空气环境已不能满足人们生活的需要，健康清洁的空气质量开始成为大众关注的热点。近年来，新型冠状病毒肆虐全球，气溶胶传播作为感染途径之一理应得到足够的重视。空气净化消毒技术对于防止细菌、病毒等病原体的扩散传播具有切实重要的意义。本文主要对多种物理类及化学类空气净化消毒技术进行详细的归纳介绍，并指出这些技术在研究及应用中存在的问题，最后提出未来理想的空气净化消毒技术应当具备的特点。
2023 Vol. 18 (5): 312-320 [
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