微生物与感染
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微生物与感染
2022年 17卷 6期
刊出日期 2022-12-25
论著
病例分析
综述
论著
337
刘彬1，2，姚秋凤1，赵平1，任浩1，戚中田1，秦照玲1
寨卡病毒感染人肝癌细胞诱导自噬以促进自身复制
寨卡病毒(Zika virus，ZIKV)为蚊媒传播病原体，感染该病毒可引起寨卡病毒病，目前尚无特异治疗药物。自噬是细胞维持自身稳态、促进胞内物质能量再利用的过程，但常被一些病毒劫持以促进自身复制。本研究以人肝癌细胞系Huh7为靶细胞，利用mTagRFP-mWasabi-LC3双荧光报告系统检测自噬体的形成；蛋白免疫印迹法检测细胞感染ZIKV不同时间后自噬标记蛋白LC3和P62的表达情况；用自噬抑制剂(渥曼青霉素、氯喹)、Beclin-1特异的短发夹RNA(short hairpin RNA，shRNA)和自噬激动剂雷帕霉素预处理细胞，再采用蛋白免疫印迹法和病毒空斑法检测其对病毒蛋白表达和胞外子代病毒含量的影响；采用蛋白免疫印迹法检测参与ZIKV感染自噬调节的信号通路。结果显示：ZIKV感染Huh7细胞后，LC3阳性自噬体的数量明显增多；自12 h开始，LC3-II的表达水平显著升高，P62蛋白表达水平在感染48 h后显著降低；两种自噬抑制剂处理和干扰Beclin-1表达均能有效抑制ZIKV感染和子代病毒的产生，而雷帕霉素处理增加了胞外子代病毒含量(
P
<0.05)；ZIKV感染增强了腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase，AMPK)和TSC2发生磷酸化，而哺乳动物雷帕霉素靶标(mammalian target of rapamycin，mTOR)的磷酸化水平下调。结果表明，ZIKV感染通过激活Huh7细胞中的AMPK/TSC2/mTOR信号通路诱导自噬，并利用自噬促进病毒复制和子代病毒的产生，这为研制以自噬相关分子为靶点的抗寨卡病毒药物提供了理论和实验依据。
2022 Vol. 17 (6): 337-346 [
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347
唐怡洁1，邬敏1，陆伟1，冯艳玲1，袁正宏2，张小楠1, 3，张占卿1
慢性乙型肝炎患者外周血循环免疫复合物的临床意义探索
免疫复合物的形成是病毒在感染过程中造成机体损伤的重要原因之一。对病毒感染者进行免疫复合物的定量有助于监测疾病进展，了解病毒与宿主之间的相互作用。本研究对早期固相C1q结合荧光免疫法进行优化，并利用补体分子C1q特异性结合慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)患者血液中的循环免疫复合物(circulating immune complex，CIC)，通过荧光标记的羊抗人IgG对CIC进行检测。针对220例CHB患者、20例非乙型肝炎的肝炎患者、20例健康者、10例CHB功能性治愈者，分析了CHB患者中的CIC水平及其与CHB诊断所用病毒学指标、肝功能生化指标之间的关系。结果显示：约97%的CHB患者存在CIC水平升高，且与病毒学指标乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antigen，HBsAg)(
r
＝0.197 3，
P
＝0.005 8)、HBV DNA(
r
＝0.217 8，
P
＝0.002 3)显著正相关；与肝脏损伤相关生化指标丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase，ALT)(
r
＝0.158 0，
P
＝0.020 0)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)(
r
＝0.151 3，
P
＝0.035 3)呈正相关，而与补体C4(
r
＝－0.21，
P
＝0.003)呈负相关。不同程度的炎症和纤维化患者之间CIC和补体水平有显著性差异，且随临床分期产生相应波动。在免疫耐受期和低复制期，患者CIC水平较低而补体水平升高；在免疫激活期和HBV e抗原(HBV e antigen，HBeAg)阴性肝炎患者中的结果则相反。结果提示，CHB患者血液循环中存在CIC生成所造成的肝脏损伤及补体大量消耗，对CIC进行监测能在一定程度上反映CHB患者潜在的肝损伤。
2022 Vol. 17 (6): 347-359 [
摘要
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360
刘袁媛1，*，秦小雯2，*，陈华昕2，于志明2，欧勤芳2，刘倩倩1，许毓贞1，杨清銮1，张冰琰1，高岩1，张文宏1，邵凌云1
活动性肺结核密切接触者结核感染情况及随访分析
本文筛查和随访结核密切接触者的潜伏感染情况和发病情况，并分析了相关的影响因素。首先，回顾性分析了2012年3月—2019年8月在无锡市第五人民医院结核科住院的活动性肺结核患者的临床资料，并随访了其中进行过γ干扰素释放试验(interferon-γ release assay, IGRA)的密切接触者。7年共完整随访到39例活动性肺结核患者及其74例密切接触者，74例密切接触者中27例IGRA阳性(36.5%)，47例IGRA阴性(63.5%)，且IGRA阳性密切接触者中无一例进展为活动性结核。单因素分析结果提示，IGRA阳性密接组和IGRA阴性密接组在吸烟 (3/27 vs 0/47，
P
＝0.045)、与结核患者接触时间 >5 h/d (22/27 vs 23/47，
P
＝0.007)、同屋居住 (23/27 vs 20/47，
P
＝0.001) 3方面的差异具有统计学意义。进一步比较发现，较于IGRA阴性密接组，IGRA阳性密接组接触的活动性肺结核患者痰涂片结核菌的负荷量更高(
P
＝0.019)。多因素分析结果则显示，肺结核患者痰涂片结核菌量能够显著影响密切接触者的IGRA结果，痰结核菌量高的活动性肺结核密切接触者更容易出现IGRA阳性。
2022 Vol. 17 (6): 360-365 [
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366
刘敏雪，梁嘉慧，黄丽英，岑贞娇，王双杰，颜程岚
南宁地区儿童耳炎病原菌分布特征及药敏分析
本研究旨在探讨南宁地区儿童耳炎病原菌分布及其药物敏感性，为临床医生合理用药提供依据。通过回顾性分析2019—2021年广西壮族自治区妇幼保健院收治的外耳道炎或中耳炎患儿的基本资料，统计培养分离的细菌和真菌构成比，并分析主要致病菌的耐药情况。结果显示：共送检耳分泌物样本918份，623例(67.86%)培养结果为阳性。其中，仅检出细菌的有438例(70.30%)，仅检出真菌为164例(26.32%)，检出细菌合并真菌为21例(3.37%)。革兰氏阳性细菌以金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌为主，革兰氏阴性细菌以铜绿假单胞菌和流感嗜血杆菌为主。念珠菌以近平滑念珠菌和白念珠菌为主，丝状真菌以黄曲霉和黑曲霉为主。药敏试验结果发现，金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺、氨基糖苷类及喹诺酮类抗生素较为敏感，而对青霉素和大环内酯类耐药率高。肺炎链球菌对青霉素、万古霉素、左氧氟沙星、阿莫西林/克拉维酸等的敏感性较高，而对大环内酯类、二代头孢的耐药率较高。阴性杆菌中，铜绿假单胞菌对青霉素类、头孢类、喹诺酮类及碳青霉烯类等均较为敏感。流感嗜血杆菌对阿莫西林/克拉维酸及氧氟沙星均敏感，对复方新诺明、氨苄西林及二代头孢部分耐药。念珠菌的药敏试验结果显示，近平滑念珠菌对三唑类抗真菌药敏感；白念珠菌对两性霉素B全敏感，对三唑类抗生素有一定的耐药性。本研究证实：南宁地区儿童耳炎感染的细菌主要为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、铜绿假单胞菌；真菌感染以近平滑念珠菌和黄曲霉为主。临床医生在治疗南宁地区儿童耳炎时，细菌性耳炎可经验性使用阿莫西林/克拉维酸或β-内酰胺类抗生素，真菌性耳炎可经验性使用伏立康唑治疗。
2022 Vol. 17 (6): 366-373 [
摘要
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病例分析
374
闵彦1,武静1,李继霞1,公衍文2,胡成进1
气管切开患者痰培养分离肢体凯斯特菌1株报道
本实验室在1例气管切开患者的痰培养标本中，发现了1种膜状生长的革兰阴性杆菌。使用全自动细菌鉴定仪Vitek2 Compact鉴定该细菌，没有得到阳性结果。分别使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)和 16S 核糖体RNA(16S ribosomal RNA，16S rRNA)测序的方法对该菌进行鉴定，结果显示为肢体凯斯特菌。该菌是一种革兰氏阴性非发酵菌。回顾国外文献仅有少量病例报道，该菌可能为条件致病菌，可在气管切开患者的痰液、肺泡灌洗液以及经皮造瘘患者的尿液中分离，还可引起菌血症并参与慢性耳炎的发生发展。国内文献对肢体凯斯特菌的分离研究罕见报道。本实验室将此病例及该菌的基本特性报道如下，以加强临床微生物检验人员对其的认识和重视。
2022 Vol. 17 (6): 374-379 [
摘要
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380
王崇圳1，魏昊东2，朱雄1，王立程1，李欢1，符晓莹1，黎元莉1，陈东科1
可可毛色二孢致角膜溃疡病例分析
本文报告1例可可毛色二孢致角膜溃疡。患者男，54岁，右眼发红，疼痛加重3天。眼科检查见右眼球结膜混合充血，角膜全层灰白色浑浊，呈地图状，面不平，前房下方可见淡白色沉积，余眼内情况窥不清。取角膜刮取物标本进行真菌荧光染色镜检和培养，对培养的菌株进行形态学和分子生物学鉴定，用E-test法进行丝状真菌药敏试验。真菌荧光染色后，镜下可见有隔菌丝。培养14 d有分生孢子座产生，分生孢子位于分生孢子座里。对培养出的丝状真菌进行基因测序，测序后确定病原菌为可可毛色二孢(
Lasiodiplodia theobromae
,
L. theobromae
)，临床诊断为可可毛色二孢引起的角膜溃疡。药敏试验结果显示，
L. theobromae
对两性霉素B和伏立康唑相对敏感。给予局部药物治疗，氟康唑滴眼液q2h滴右眼，同时使用氟康唑氯化钠注射液0.4 g qd静脉滴注。患者治疗5 d未见好转，要求出院。
2022 Vol. 17 (6): 380-385 [
摘要
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综述
386
孙健1，2，张继明1，3，4
髓源性抑制细胞研究进展
髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells, MDSCs)是一群表型异常、具有免疫抑制功能的髓系来源细胞。在进展期肿瘤、败血症、慢性感染等病理环境中，MDSCs大量扩增并通过多种途径抑制T淋巴细胞等免疫细胞的增殖、活化和迁移，MDSCs的数量与疾病进程和患者转归密切相关。通过单细胞测序、质谱流式等新技术，研究人员发现MDSCs和正常髓系细胞在表型标记分子、基因表达、能量代谢和调控通路上存在明显差异。特别是在肿瘤领域，MDSCs靶向治疗研究也取得了丰硕的成果。本文以MDSCs研究里程碑为起点，以MDSCs靶向治疗机制及其在感染性疾病中的作用为重点，对MDSCs新近研究成果进行综述。
2022 Vol. 17 (6): 386-394 [
摘要
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395
王环茹1, 滕峥1, 石琦2, 张曦1
克雅氏病的实验室检测技术研究进展
克雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease, CJD)是一种在人类中最为常见的海绵状脑病，其致病因子为朊病毒。由于该病的致死率为100%，且具有传播风险，CJD的早期诊断对疾病防控具有重要意义。临床上一般依据患者的临床症状与体征以及相应的实验室检测来进行CJD的鉴别诊断。本文主要围绕现有的CJD实验室检测技术展开综述，包括朊病毒的直接与间接检测、疾病标志物的检测以及疾病相关基因PRNP的检测与分析等，旨在为进一步推广和规范CJD的实验室检测提供参考与技术依据。
2022 Vol. 17 (6): 395-400 [
摘要
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25
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