微生物与感染
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微生物与感染
2023年 18卷 4期
刊出日期 2023-08-25
特约专稿
论著
病例分析
综述
特约专稿
193
廖雪姣 吴舒婷 马拯华 卢洪洲
长新冠临床研究进展
COVID-19及其变异毒株引发的感染浪潮对全球公共卫生带来了极大的挑战，尽管现阶段对已进入后疫情时代，但目前面临的一个新的危机是COVID-19感染后所导致的长期影响，主要表现为呼吸、神经精神、心血管和胃肠系统等症状，部分COVID-19患者的症状包括并发症可持续数月甚至数年，我们称之为长期新冠肺炎（LongCOVID）。在未来几年，随着康复患者人数的急剧增加，LongCOVID可能会显著地影响患者生活质量和社会医疗保健成本，给家庭与社会造成巨大负担。因此研究新冠患者在恢复期的长期健康状况及动态变化规律至关重要。
2023 Vol. 18 (4): 193-202 [
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论著
203
邢一凡 傅美贤 龙健儿
基于杂交链反应的新一代RNA-FISH技术检测肠道病毒A71 RNA及其与病毒3D聚合酶的相互作用
RNA荧光原位杂交(RNA -fluorescence in situ hybridization, RNA-FISH)是利用荧光标记的核苷酸探针，通过互补链杂交，对细胞或组织中的特定的RNA序列进行检测和定位。由于RNA-FISH产生的阳性信号较弱，需要结合特异性信号放大，提高信噪比。但传统信号放大技术，背景难以消除，无法定量且分辨率低，是RNA-FISH应用的巨大障碍。本文基于第三代杂交链反应（Hybridization chain reaction version 3.0，HCR v3.0)， 利用一对分裂式探针消除非特异杂交背景，并引发荧光信号放大反应，建立了针对肠道病毒A71 (Enterovirus-A71, EV-A71) RNA的敏感、特异FISH检测方法，并将该技术与蛋白免疫荧光(Immunofluorescence, IF)检测结合，通过高分辨率激光共聚焦成像，成功地在单个细胞水平上检测了EV-A71感染细胞后病毒RNA与其聚合酶3D蛋白的分布变化和相互作用情况，并对细胞中病毒RNA和3D蛋白进行定量。发现与传统定量方法(RT-qPCR和Western Blot）相比，单个细胞水平上，病毒RNA和3D聚合酶的表达情况与群体细胞检测的结果在趋势上有明显差异。这说明，基于杂交链反应的新一代RNA-FISH技术，可以克服群体细胞数量增减掩盖病毒组分变化的缺点，从而真实反映病毒在单个细胞中的变化。
2023 Vol. 18 (4): 203-210 [
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211
董泽令 朱杰华 杜文胜
外泌体miRNA hsm-let-7家族成员有望作为结核性胸水与炎性胸水鉴别诊断的重要指标
目的 进一步探讨结核性胸膜炎患者胸水和血清外泌体中miRNA的差异性表达情况，为寻找结核性胸膜炎的诊断与鉴别诊断潜在生物学标志物提供依据。方法 收集20例肺结核合并结核性胸膜炎(试验组)患者、20例肺炎合并炎性胸水（对照组2）患者的胸水和血清样本、以及20例健康体检者（对照组1）血清样本，分离外泌体后提取总RNA，采用实时荧光定量PCR法分析外泌体中miRNA的表达情况。 结果 比较分析各组外泌体中miRNA相对表达量，结果显示：与对照组1血清外泌体miRNA表达水平相比，对照组2血清外泌体中miRNA表达水平均有不同程度的升高，其中升高明显有let-7a-5p、let-7c-5p、let-7i-5p和miRNA-126-3p，而试验组血清外泌体中miRNA表达水平升高更明显，其中升高最为明显的有let-7a-5p、let-7d-5p、let-7e-5p、miRNA-126-3p、let-7g-5p和let-7c-5p，差异均有统计学意义（P＜0.05）；与对照组2胸水外泌体miRNA的表达水平相比，试验组胸水外泌体中miRNA水平普遍升高，升高较明显的有let-7f-5p、let-7g-5p、let-7d-3p;试验组胸水和血清外泌体中miRNA表达也存在显著差异表达（P＜0.05）结论 结核性胸膜炎患者胸水和血清外泌体中miRNA与一般性肺炎合并胸水患者胸水和血清外泌体miRNA存在差异性表达，hsm-let-7家族成员，可以作为结核性胸水与一般炎性胸水的鉴别诊断指标。
2023 Vol. 18 (4): 211-218 [
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219
曾敏敏 吉滢 戈艺潼 郑学明 孟苒 黄新祥
不同培养条件下伤寒沙门菌外膜囊泡对结直肠癌细胞增殖的影响
为探讨不同培养条件下伤寒沙门菌外膜囊泡（S. Typhi-OMVs）对结直肠癌细胞增殖的影响，本研究采用超速离心法分别提取伤寒沙门菌在LB、分别加入酸、高渗、氧应激源的LB以及LPM培养条件下分泌的外膜囊泡，并通过电镜形态、粒径及蛋白分布情况对不同培养条件下的S. Typhi-OMVs进行比较。体外培养结直肠癌HT-29、SW480及CT-26细胞，CCK-8检测不同时间点S. Typhi-OMVs（酸、高渗、氧应激及LPM培养条件）对结直肠癌细胞增殖的影响，克隆形成实验进一步验证；流式细胞术检测细胞周期；通过统计体重及肝肾组织HE染色切片评价S.Typhi-OMVs在小鼠体内的药物毒性。结果显示不同培养条件下的S.Typhi-OMVs在形态大小方面无明显差异，与其他培养条件相比，高渗应激下伤寒沙门菌能分泌更多的外膜囊泡，在LB和酸应激、高渗和氧应激、LPM培养条件下，S. Typhi-OMVs的蛋白分布分别为37~72KDa、25~72KDa、8~55KDa；S. Typhi-OMVs（LPM培养条件）能显著抑制SW480和CT-26细胞的增殖能力，并将SW480细胞的细胞周期阻滞在G2/M期，且对小鼠无明显肝肾毒性。结果表明S. Typhi-OMVs（LPM培养条件）对结直肠癌细胞（SW480、CT-26）的增殖具有直接抑制作用，有望成为结直肠癌的治疗药物。
2023 Vol. 18 (4): 219-226 [
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病例分析
227
朱惠怡 孙小瀑 杨森 郭一霖 张亚文 卢成瑜 陈德晖
儿童突发MRSA感染相关性肠炎1例及文献复习
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)一般极少引起肠炎，MRSA感染相关性肠炎一般多见于长期使用抗生素以及胃肠手术后患者。本例患儿无长期用药史及手术史，突然出现发热、呕吐、转移性右下腹痛就诊，病初疑诊阑尾炎，完善腹部CT检查后并未发现阑尾炎影像学征象，反而可见患儿肠管异常扩张以及气粪潴留，经肛管引流出大量绿色水样便。经咽拭子和粪便病原学检验，患儿确诊MRSA感染相关性肠炎。给予万古霉素口服抗感染以及对症治疗后患儿康复出院。本研究结合本病例以及关于MRSA感染相关性肠炎的相关文献分析，对MRSA感染相关性肠炎的发病诱因，临床表现，治疗方案以及本病例的治疗效果进行深入剖析，为MRSA感染相关性肠炎的规范化诊疗提供新的思路。
2023 Vol. 18 (4): 227-234 [
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235
王丹 许颖
苏黎世放线菌致腹膜透析导管隧道感染1例
苏黎世放线菌（Actinomyces turicensis）是一种单细胞原核微生物，是健康人群口腔主要菌群，该菌若进入其他部位引起感染，可导致放线菌病。本文介绍了1例苏黎世放线菌引起的腹膜透析导管隧道感染病例，患者先后经过美罗培南、头孢噻肟抗感染治疗后，病变好转出院。本文通过学习苏黎世放线菌感染的临床特点、实验室检测及治疗方法，帮助临床医师进一步熟悉对该类疾病的诊断和治疗，并强调临床和实验室应保持及时、有效的临床沟通，才能达到早诊断、早治疗目的。
2023 Vol. 18 (4): 235-239 [
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张晓煜 张丽 吴卫星 齐军 吴宗勇 王敏
8例肿瘤患者脆弱拟杆菌血流感染的病例分析
脆弱拟杆菌（Bacteroides fragilis,BF）是人体肠道共生菌，也是临床工作中检出率较高的厌氧菌。本案例收集2020年6月至2021年12月由8名肿瘤患者血培养中分离的12株厌氧菌，经基质辅助激光解析电离-飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS ) 技术鉴定为脆弱拟杆菌。病历分析结果显示：5名患者为结直肠癌患者；手术是脆弱拟杆菌最常见的易感因素（4/8）；临床最常使用的药物为亚胺培南西司他丁钠（4/8）；所有患者抗生素治疗效果良好，发热及感染控制，复查血培养转阴。本报道通过对肿瘤患者血流感染脆弱拟杆菌的感染因素和抗生素治疗进行回顾分析，为微生物实验室检测和临床诊治提供依据。
2023 Vol. 18 (4): 240-245 [
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罗艺兵
弗尼斯弧菌引起的急性腹泻1例
摘 要：弗尼斯弧菌(Vibrio furnissii)是革兰阴性短小杆菌，多从腹泻病人粪便中分离得到。国内、外少见对弗尼斯弧菌感染的相关报道。本文报道就诊于南宁市第二人民医院的1例急性腹泻患者感染弗尼斯弧菌病例，患者腹泻感染症状典型，表现为4年反复腹泻，7-8次/天。来自该病例的弗尼斯弧菌因全部分生化反应与河流弧菌相似难以区分，与质谱鉴定结果有所差异，最终经16S rRNA基因测序，确定为弗尼斯弧菌。针对弗尼斯弧菌的生长情况、实验室检测及回顾性分析相关文献报道，提高实验室人员对于该菌的认识以及对临床诊治少见弧菌引起的腹泻病有所帮助。
2023 Vol. 18 (4): 246-250 [
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综述
251
纪凌云 吴晶 周旸 吴文娟
阴道微生物组与人乳头瘤病毒感染和宫颈病变相互作用研究进展
人类阴道微生物组（vaginal microbiota, VMB）在维持健康和体内平衡方面起着至关重要的作用，与其他器官的微生物组相比，该组表现出低多样性。宫颈癌（cervical cancer， CC）是女性常见的恶性肿瘤，已证实与高危型人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）持续感染高度相关，其发病率在泌尿生殖系统中仅次于乳腺癌。越来越多的证据表明，阴道微生态失调可能在HPV感染和宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）的进展中起积极作用，从而导致CC，但很少有驱动这些关联的机制研究。本综述重点讨论有关阴道微生物组，HPV持续性感染和宫颈异型增生之间的关系以及介导这些关系的因素，这将有助于寻找VMB相关疾病的新靶点，进一步管理HPV相关妇科疾病，从而在临床实践中改变潜在的风险因素并指导临床对相关疾病进行治疗。
2023 Vol. 18 (4): 251-256 [
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